杜鹃花组织培养研究概况

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1、杜鹃花组织培养研究概况作者：郭秀莲，张正银，王晓东，樊哲仁，白洁，陈放【摘要】杜鹃花(Rhododendron)的组织培养受基因型、外植体的来源、培养基种类、培养条件、生长调节物质、培养程序等诸多因素的影响，故具有一定的复杂性。文章概述了影响杜鹃花组织培养的关键因素：外植体种类，外植体消毒灭菌的方法，基本培养基的选择，根的诱导方法等的国内外研究现状，以期能给杜鹃花的组培研究带来一些借鉴价值。【关键词】杜鹃花;组织培养　　Abstract：Genotype,explantssource,thetypeofmedia,cu

2、ltureconditions,groereferencevaluestothetissuecultureresearch,thepaperrevieeandabroad,includingthetypeofexplants,sterilizationmethodstoexplants,choiceofthebasicmedium,rootingandsoon.　　Keypionae与比利时杜鹃R.hybridun采用新发幼苗新梢。2001年钟宇[3]以不同季节的茎尖(含茎段)为材料，培养西洋杜鹃R.hybridn，结

3、果表明，最适外植体为摘花芽后萌发的顶芽茎尖。2003年王亦菲等[4]对两种来自比利时的高山西洋杜鹃R.britannia，R.america的茎尖进行了成功培养。2003年梁晓华等[5]对亮毛杜鹃R.microphyton的茎尖进行了培养，但成功率不高。2004年闫凤霞等[6]选取杜鹃花R.simsii茎尖、嫩叶和老叶为外植体，诱导不定芽产生再生植株，结果表明茎尖、嫩叶效果较好。　　1982年Meyer等[7]以花芽作外植体，成功培养了NovaZembla，RoseumElegans，Sefon等品种的杜鹃。　　198

4、6年，从毛叶杜鹃R.mollium叶片培养得到植株[8]。1991年报道了以叶为外植体，离体条件下诱导杜鹃R.‘P.J.M.Hybride’植株再生[9]。1996年，从杜鹃R.simsii7个栽培品种Paloma，Avenir，Mme.Petrick，Aline，Flamenco，Lara和Mme.M.DePaepe叶片诱导植株，该试验从叶片诱导出了不定芽，但在进行生根诱导培养时未获得成功[10]。2003年秦静远等[9]从R.simsii品种“HellmutVogel”幼叶诱导出愈伤组织，并进一步分化为丛生苗。　　

5、1987年有报道从子房组织诱导杜鹃R.prinophyllum再生[8]。　　1985年，有人培养春鹃和西鹃茎尖成功率仅4%～5%，后用种子无菌苗茎段培养获得成功。1991年，从茎段再生杜鹃R.laetum×aurigeranum获得成功[8]。2002年邓百万等[10]对比利时杜鹃的幼茎进行培养，使休眠腋芽萌发，且诱导出不定芽，并从幼叶诱导出愈伤组织。2004年，汤桂钧等[11]以德国产高山杜鹃R.lapponicum的茎段和茎尖进行外植体诱导试验，结果显示，茎段诱导无菌芽效果较好。2006年朱春艳等[12]以新发茎

6、段为外植体，研究了云锦杜鹃R.fortunEi的组培快繁技术，取得成功。2007年，罗彭等[13]以幼嫩茎段为外植体对大白杜鹃R.decorum、美容杜鹃R.calophytum、喇叭杜鹃R.discolor进行组培研究，效果较好。2008年程雪梅等[14]以马缨杜鹃R.delavayi的种子萌发的无菌苗茎段为外植体进行研究，获得成功。　　1993年有报道从雄蕊诱导杜鹃R.‘P.J.M.’再生植株和器官发生[13]。　　总结以上表明，最优良的外植体是旺盛生长季节(3月下旬到4月上旬)杜鹃新发枝的幼嫩芽[15]，这个时期

7、外植体处于旺盛的生长状态而且芽的苞片还未展开，将带苞片的芽进行消毒，即使灭菌时间长一些也不会伤害到里面的茎尖生长点，接种后成活率高，增殖速度快，褐变程度轻。　　2外植体消毒灭菌的方法　　在对三叶胶初级培养污染的研究中发现高温、多雨的环境易导致污染，而且随着植物材料年龄的增长，植物材料的健康状况不断恶化，组培污染也会更加严重，研究认为外植体带菌多少的顺序为：腋芽<茎尖<顶点[16]。外植体的状况、环境条件和操作过程是引起污染的主要原因。对大多数植物来说，采用新生的或新抽的枝条，4～5月份的新叶、茎尖、枝条，污

8、染率可下降20%～30%。　　杜鹃外植体消毒困难，腋芽，顶芽和雌蕊等幼嫩部位若消毒时间过长，容易死亡，若消毒时间缩短，则菌尤其是内源菌难以杀死。大多研究者采用自来水冲洗外植体5～30min，饱和洗衣粉水洗5～30min，自来水冲洗5～30min，在无菌条件下用浓度70%酒精消毒15～30s，无菌水冲洗1次，再用浓度0.1%HgCl