丙酸氟替卡松对哮喘小鼠气道重塑及tgfβ1表达的影响论文

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1、丙酸氟替卡松对哮喘小鼠气道重塑及TGFβ1表达的影响论文【关键词】丙酸氟替卡松；哮喘；气道重塑；转化生长因子β；小鼠近年来越来越多的研究证据表明,支气管哮喘除了存在气道炎症和非特异性气道高反应性外，亦存在气道重塑，组织学呈现上皮细胞增生、上皮下胶原沉积和纤维化，以及平滑肌细胞增生肥大的异质性改变,引起气道壁厚度的增加，导致气流的不可逆性阻塞和气道的持续性高反应［1］.现普遍认为气道重塑是炎症所造成组织损伤后不完全或过度修复所致［2］.糖皮质激素是目前控制哮喘最为有效的抗炎药物，但对气道重塑的作用目前相关

2、的研究报道较少［3-4］.本研究利用哮喘小鼠气道重塑模型，观察早期应用丙酸氟替卡松后，气道壁管壁厚度、平滑肌厚度以及TGFβ1表达的变化.freelin，OVA)，丙酸氟替卡松干粉（美国Sigma公司）；TGFβ1兔抗小鼠多克隆抗体（北京中山生物工程有限公司）；链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物(streptavidinbiotionplex,SABC)免疫组化检测试剂盒（北京中山生物技术有限公司）.1.2方法1.2.1动物分组和模型的建立雄性小鼠30只，随机分为哮喘组(A组)，正常对照组(B组

3、)，丙酸氟替卡松治疗组(C组)，每组动物10只.参照文献［5］的方法，A组：第l日腹腔注射OVA氢氧化铝混悬液0.2mL(内含OVA10μg及氢氧化铝20μg)，第l5日重复致敏1次，自第22日开始予以25g/LOVA生理盐水溶液雾化吸入，每日1次，每次30min，持续4in吸入丙酸氟替卡松，浓度为0.17g/L（10mgFP加入60mL生理盐水），每次吸入时间10min，持续4，部分切片经苏木精伊红(HE)染色并行病理学观察，部分进行免疫组化染色.1.2.3免疫组化SABC法石蜡切片脱蜡至水，30g

4、/L过氧化氢室温孵育10min，以消除内源性过氧化物酶的活性，微波加热行抗原修复处理，滴加一抗兔抗鼠多克隆抗体(1∶100)，二抗生物素化山羊抗兔IgG(1∶200)，DAB显色，苏木精复染，中性树胶封片，阴性对照以磷酸盐缓冲液代替一抗而其它条件均相同.1.2.4定量及计算机图像分析参照文献［6］的方法，将待测切片放在连接计算机的显微镜下放大400倍，找到完整的肺内支气管横断面，每只动物切片随机选取直径100～200μm完整的小支气管横截面5个，采用leikaQ500分析系统测定支气管基底膜周径(bas

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