葡萄糖对l02细胞lxrα与angptl3基因表达的影响论文

《葡萄糖对l02细胞lxrα与angptl3基因表达的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、葡萄糖对L02细胞LXRα与ANGPTL3基因表达的影响论文曾建涛，王继红，黄家利，程梅【摘要】目的：研究葡萄糖对L02细胞肝X受体(LXRα)与血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)基因表达的影响，探讨LXRα在糖尿病和脂代谢联系中的作用.方法：用5.6,7.0,11.1,28.0和33.0mmol/L的葡萄糖培养L02细胞，5.6mmol/L组作为对照组.用胆固醇酶联法测定各组细胞内胆固醇含量，采用RTPCR方法检测LXRα和ANGPTL3的mRNA表达量.结果：高浓度葡萄糖可促进L02细胞内胆固醇含量上调LXRα和ANGPTL3mRNA表达，变化差异均有统计

2、学意义(P0.05).结论：高浓度葡萄糖增加ANGPTL3表达.freelentofdiabetesmellitusacpaniedia.METHODS:L02cellsediumscontaining5.6,7.0,11.1,28.0and33.0mmol/Lglucose,amongmol/Lglucosegroupedbycholesterolenzymelinkassays.TheLXRαandANGPTL3mRNAinedbyreversetrancriptasepolymerasechainreaction(RTPCR).RESULTS:Theexp

3、ressionofLXRαandANGPTL3mRNAincreasedayinterfereANGPTL3mRNAthroughincresasingtotalcholesterol,activatingLXRα.TheactivationofLXRαupregulatestheexpressionofANGPTL3.【Keyellitus0引言肝X受体（liverXactivatedreceptor,LXRs）是核受体超家族的成员，包括两种同源亚型LXRα(NR1H3)和LXRβ（NR1H2）.LXRs作为甾醇类感受器调节一系列与脂质代谢相关基因的表达.血管

4、生成素样蛋白3（angiopoietinlikeprotein3,ANGPTL3）是新的LXRs靶基因，在脂质代谢中有重要作用［1-2］.本研究以人肝细胞株L02为研究对象，从细胞水平研究葡萄糖对LXRα和ANGPTL3基因表达的影响，探讨LXRα在糖尿病和脂代谢联系中的作用.1材料和方法1.1材料人肝细胞株L02（重庆医科大学基础医学研究所）；RPMI1640普通培养基（美国Gibco公司）；新生牛血清（杭州四季青公司）；RT试剂盒（日本Toyobo公司）；PCR试剂盒（广州东盛生物公司）；LXRα,.freelL/L新生牛血清的RPMI1640培养液中培养3

5、6h后，随机分为5组（G1～G5），分别在不同浓度葡萄糖的培养液中培养24h.G1组为对照组.1.2.2胆固醇含量测定5组L02细胞用RPMI1640培养基培养24h后，用PBS洗细胞2次，加细胞裂解液裂解细胞，30min后再超声裂解4次，4℃12000g离心15min.用Log/g).1.2.3两种基因mRNA表达的检测按试剂说明，常规方法提取细胞总RNA，检测总RNA的纯度和完整性.用RTPCR方法检测各基因的mRNA表达量.LXRα上游引物：TCCCACGGATGCTAATG，下游引物：TCCCAGGAATGTTTGCC.ANGPTL3上游引物：TCCAG

6、AACACCCAGAAGTAAC，下游引物：CCAGCCTCCTGAATAACCCT.βActin上游引物：TCCTCCCTGGAGAAGAGCTA，下游引物：TCAGGAGGAGCAATGATCTTG..PCR反应条件为：94℃预变性4min后进行94℃30s，55℃30s，72℃1min，共35个循环，72℃延伸10min.取各基因扩增产物6μL用于25g/L琼脂糖电泳，溴化乙啶染色后采集图像,用ANGPTLl3，LXRα与βActin面积灰度值的比值表示各基因mRNA的表达量.统计学处理：用SPSS13.0软件包进行统计分析.数据以x±s表示，多组均数的

7、比较采用单因素方差分析，两两之间比较用LSDt检验，P0.05为差异有统计学意义.2结果2.1葡萄糖对细胞内胆固醇含量的影响随着环境葡萄糖浓度增加，细胞内胆固醇含量也不断增加，G1～G5五组间总胆固醇含量相比较，差异具有统计学意义(P0.05).G2～G5组分别与G1组相比，G2组的总胆固醇升高，但差异无统计学意义(P0.05)，而G3～G5组差异均有统计学意义(P0.05).G3组，G4组和G5组三组间两两比较，差异均无统计学意义(P0.05，表1).表1葡萄糖对L02细胞ANGPTL3与LXRα表达和胆固醇含量的影响（略）aP0.05vsG1.2.2葡萄糖对

8、LXRα和