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时间:2018-11-19
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1、Morris水迷宫检测大鼠记忆力方法的探讨论文罗小泉,骆利平,陈海芳,涂明珠,黎艳刚,袁金斌,杨武亮【摘要】目的探求一种合理的检测大鼠记忆力的方法。方法连续4天对痴呆模型组大鼠和假手术组大鼠进行Morris水迷宫定位航行实验,每天训练4次.freelethodfortestingmemorycapacityinrats.Methodsethod;FacultyofmemoryMorris水迷宫(M)是英国心理学家Morris于20世纪80年代初设计的用于研究大鼠空间学习记忆的装置1。该方法主要应用于学习记忆、老年痴呆、缺血性痴呆、智力与衰老、行为生物学等方面的研究。通过该实验所
2、得到的丰富的实验参数进行分析,从而对影响学习记忆效果的相关药物效果及疾病相关模型的判断进行评价。现在检测大鼠记忆力的Morris水迷宫的指标有很多,其中最常用的评价指标是定位航行实验的“逃避潜伏期”2。然而在统计分析时,Morris水迷宫的实验数据较为复杂,其统计分析难度也较大,尤其是对大鼠在定位航行中所测得的逃避潜伏期如何进行统计学分析存在的问题一直较多。为此,我们对不同入水象限,不同入水次序对成绩的影响分别进行了考察并对Morris水迷宫实验数据的统计方法进行探讨,以求寻找到一种合理可行的检测方法。1材料雄性SD大鼠20只,体质量(190±20)g,SPF级(湖南斯莱克实验
3、动物有限公司,许可证号:SCXK(湘)202009-0004);水合氯醛,上海青析化工有限公司提供;Morris水迷宫为直径160cm,高50cm的圆形水池,水池内壁被漆为黑色,池内水深25cm,水温保持在(22±2)℃,房间内光照恒定,无光线直射在水池内。池壁上以4个等距离点将水池分为4个象限,在目标象限(设为第3象限)内距离池壁35cm处放有直径为12cm,高23cm的圆形黑色站台,站台位于水面下2cm。池壁内侧贴有不同形状的标记物。迷宫上方安置连接显示系统的摄像机,同步记录大鼠运动轨迹。采用北京天鸣宏远科技发展有限公司研制开发的Morris水迷宫视频分析系统进行信息处理。
4、2方法2.1动物模型的制备将大鼠用水合氯醛(350mg/kg,腹腔注射)麻醉后,仰卧固定在手术板上,常规消毒,颈正中切口,分离双侧颈总动脉,将痴呆模型组的大鼠两侧颈动脉结扎,缝合伤口,.freelorris水迷宫实验手术造模20天后开始进行水迷宫训练,实验前将大鼠置于站台上适应10s,随后将大鼠随机从不同象限面壁置入池内,大鼠登上站台5s后终止记录,最长记录时间为120s,若大鼠在120s内不能上台,引导其登上站台适应10s,最后将大鼠擦干放入鼠笼。如此将大鼠置入游泳池,每天4次,每次间隔1h,定位航行训练需要4d。测量平台逃避潜伏期,以评判大鼠的空间记忆能力。2.3统计分析方
5、法2.3.1入水象限的比较将每天的实验数据按不同入水象限进行统计,实验结果用20只大鼠总体的平均逃避潜伏期()表示,比较不同入水象限的结果。2.3.2入水次序的比较将每天的实验数据按入水的次序进行统计,实验结果用20只大鼠总体的平均逃避潜伏期()表示,比较不同入水次序的结果。2.3.3两种评价方法的比较方法1:采用每天第一次的水迷宫训练数据作为评价两组大鼠记忆力的指标,统计结果用(±s)表示,采用SPSS10.0软件进行t检验分析。方法二:采用每天4次水迷宫训练的数据平均值作为评价两组大鼠记忆力的指标,统计结果用±s表示,采用SPSS10.0软件进行t检验分析。3结果3.1不同
6、入水象限的比较结果结果见表1。表1每天不同入水象限的平均逃避潜伏期由表1可以看出每天从第3象限(目标象限)入水的平均逃避潜伏期都要比当天其他象限短,第1象限(远离目标的象限)入水的逃避潜伏期都要比其他象限长,说明大鼠在第3象限入水找到平台的几率更大,而从第1象限入水找到平台的随机性较小。3.2不同入水次序的比较结果结果见表2。由表2可以看出随着当天训练次序的增加,逃避潜伏期有逐渐缩短的趋势。说明随着当天训练次数的增加,大鼠的瞬时记忆会不断加强,而入水次序较末的成绩反应出的只是临时记忆不是短时或是长时记忆,只有每天第1次的成绩反应的才不是瞬时记忆。表2每天不同入水次序平均逃避潜伏
7、期3.3两种评价方法的比较方法一采用每天第1次的水迷宫训练数据作为评价两组大鼠记忆力的指标,统计结果用±s表示,采用SPSS10.0软件进行t检验分析。结果见表3。表3大鼠每天第1次定位航行实验的逃避潜伏期结果方法二:采用每天4次水迷宫训练的数据平均值作为评价两组大鼠记忆力的指标,统计结果用±s表示,采用SPSS10.0软件进行t检验分析。结果见表4。表4大鼠每天4次定位航行实验的逃避潜伏期结果由表3可以看出,假手术组与双侧结扎组的逃避潜伏期比较有显著的差异;表4中的两组数据相比较,虽然有假
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