青梅茎中总三萜酸的含量测定

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1、青梅茎中总三萜酸的含量测定作者：莫峥嵘王安伟莫燕琴陈光英韩长日【摘要】目的测定青梅茎中总三萜酸的含量。方法以熊果酸为对照品，5％香草醛-冰乙酸和高氯酸为显色剂，采用紫外分光光度法在548nm波长处测定样品的吸光度。结果熊果酸对照品在20～100μg范围内呈良好线性关系。其回归方程为Y=-0.0405+0.00829X，R2=0.9994。青梅茎中总三萜酸的含量约为2.15％。结论紫外分光光度法适合青梅茎中总三萜酸的含量测定，方法操作简便，结果稳定，重复性好。【关键词】分光光度法总三萜酸青梅青梅VaticamangachpoiBlanco［1］系龙脑香

2、科(Diptercocarpaceae)青梅属(Vaticagenus)植物，青梅又称为青皮、海梅和油楠，主要分布于海南保亭、三亚、东方、白沙、乐东、万宁和琼中等地区。在民间，青梅叶长期用作杀菌消毒，治疗肝炎及提取中药龙脑香。通过对青梅茎的有效成分的提取、分离、纯化及结构鉴定，确定青梅茎中含有熊果酸(Ursolicacid)［2］。熊果酸是三萜酸类化合物，三萜酸类广泛地存在于自然界，且有广泛的生物活性，如抗炎活性，抗肿瘤活性，抗菌和抗病毒活性，降低胆固醇，降血糖，免疫活性，杀软体动物活性等［3］。青梅茎中总三萜酸的含量测定还未见报道，而紫外分光光度法

3、可用于总三萜酸的含量测定［3］。为了充分利用青梅药用植物，本实验以熊果酸为对照品，利用紫外分光光度法首次测定青梅茎中总三萜酸的含量，为青梅的开发利用提供有意义的基础数据。1仪器与材料紫外可见分光光度计（北京普析）；RV05-ST旋转蒸发仪（德国）；95%乙醇，无水乙醇，香草醛，高氯酸，冰醋酸均为国产分析纯；青梅药材采自海南万宁，经海南师范大学生物系钟琼芯副教授鉴定为龙脑香科青梅属植物Vatica.mangachpoiBlanco。标本现存于海南师范大学海南省热带药用植物化学重点实验室；熊果酸对照品购自芜湖甙尔塔医药科技有限公司DELTA(甙尔塔)天然

4、有机化合物信息中心。2方法［3～6］2.1对照品溶液的制备准确称取105℃干燥至恒重的熊果酸对照品10.0mg，置于100ml容量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为100μg/ml的对照品。2.2供试品溶液的制备将粉碎过的青梅茎于50℃干燥，准确称取5.00g，用200ml的95%乙醇超声提取20min，抽滤，滤渣再用100ml的95%乙醇超声提取20min，合并滤液，回收乙醇，残留物放冷至室温，用无水乙醇溶解并定容至50ml，准确吸取3ml于50ml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，制得供试品溶液。2.3测定波长的确定经紫外扫描，

5、熊果酸在548nm波长处有最大吸收，空白无干扰。3结果［3～6］3.1标准曲线的绘制准确吸取对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml分别置于5个已编号的5ml容量瓶中，沸水浴挥去无水乙醇，冷却，加入5%香草醛冰乙酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，将容量瓶放人60℃水浴中加热15min，冷却至室温，用冰醋酸定容到刻度，摇匀。在548nm波长处测定吸光度值。结果见表1。表1对照品不同熊果酸含量的吸光度以熊果酸含量（μg）为横坐标，吸光度值为纵坐标，作图得到标准曲线，其回归方程为Y=-0.0405+0.00829X，R2=0.9994。结果表

6、明，熊果酸在20～100μg范围内，熊果酸含量（μg）与其吸光度呈良好的线性关系。3.2稳定性实验分别取对照品溶液及供试品溶液0.4ml，按含量测定条件测定，在548nm处每间隔10min测其吸光度值（见表2）。结果表明，在显色90min内，对照品溶液和供试品溶液稳定性都比较好。表2不同时间吸光度值3.3精密度实验取同一批样品，进行5次平行实验，测定含量，结果表3，RSD=2.77%，表明精密度良好。表3精密度实验3.4重复性实验准确称取同一批青梅茎粉末5份，每份5.00g，按“2.2”项方法制备供试品溶液，并按含量测定条件测定。结果见表4。RSD=

7、2.78%。表4重复性实验3.5加样回收率实验准确称取5份已知含量的青梅粉末各5.00g，准确加入一定量的的熊果酸对照品，按“2.2”项方法制备供试品溶液，按含量测定条件测定（结果见表5）。结果表明，平均回收率为102.5%，RSD=0.62%。表5加样回收率实验3.6样品含量测定准确称取3份青梅粉末各5.00g，按“2.2”项方法制备供试品溶液。从上述3份供试品溶液中各取0.4ml，沸水浴挥去无水乙醇，冷却，加入5%香草醛冰乙酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，将容量瓶放人60℃水浴中加热15min，冷却至室温，用冰醋酸定容到刻度，摇匀。在548n

8、m波长处测定吸光度值，结果见表6。表6青梅茎中总三萜酸的含量测定4结论青梅茎中总三萜酸含量的测定未见