去辣椒素敏感性窦房结传入神经的大鼠模型的建立

《去辣椒素敏感性窦房结传入神经的大鼠模型的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、去辣椒素敏感性窦房结传入神经的大鼠模型的建立作者：张艳辉，马爱群，席雨涛【关键词】窦房结；,传入神经；,辣椒素；,模型　　Modelingofcapsaicinsensitivesinoatrialnodedeafferentedrat　　【Abstract】AIM:Toinvestigatetheodels.METHODS:Highconcentrationofcapsaicinonths,itters［substanceP(SP)andcalcitoningenerelatedpeptide(

2、CGRP)］inthesinoatrialnodeareathroughimmunofluorescentstainingandlaserconfocalmicroscopy.RESULTS:Atplannedtimepointsafterthedeafferentationoperationandtheshamoperation,immunohistochemistryshooperatedrats,ethod.　　【Keyodel　　【摘要】目的：探讨建立去除大鼠辣椒素敏感性窦房结传入神经模型

3、的方法.方法：在大鼠上腔静脉周围应用高浓度的辣椒素建立去辣椒素敏感性窦房结传入神经模型，通过免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测传入神经递质P物质（SP）和降钙素基因相关肽（CGRP）的变化.结果：经辣椒素处理后在不同的观察时间，激光共聚焦显微镜观察显示窦房结区域CGRP和SP阳性神经纤维消失，而假手术组大鼠则清楚地呈现CGRP和SP的阳性神经纤维.结论：应用高浓度的辣椒素于大鼠上腔静脉根部周围可以建立去辣椒素敏感性窦房结传入神经大鼠模型.该模型指标稳定，造模方法可重复性强.　　【关键词】窦房结；传

4、入神经；辣椒素；模型　　0　引言　　近年来，一些研究者发现传入神经参与了冠心病的发病过程和心脏缺血预适应的调节机制［1］.而有关窦房结传入神经作用的　　2　结果　　手术后各组免疫荧光结果显示窦房结组织区H4免疫荧光染色呈强阳性.共聚焦显微镜观察显示假手术组大鼠H4强阳性表达的窦房结区域可见条索状不规则形的传入神经递质P物质（substanceP,SP）阳性纤维，以窦房结动脉周围分布密度最大，结动脉壁上也有一定量分布.同样，在窦房结区域可见细线状或串珠状的CGRP阳性纤维，以窦房结动脉周围分布密度最

5、大.　　去神经组大鼠H4强阳性表达的窦房结区域未见到SP阳性纤维.而心房区域仍有一定量SP阳性纤维分布.窦房结区域未见到CGRP阳性纤维.而心房区域仍有细线状的CGRP阳性纤维分布.在同一大鼠中SP的表达与CGRP相比略少（图1）.　　3　讨论　　以往研究者们也一直在探索着如何利用去除窦房结的神经来研究其调节作用及其机制.但是哺乳动物的窦房结本身形态结构小，支配它的神经更是难以用肉眼观察到.而且心脏的传入神经在形态上不自成系统，而是串行于交感神经和副交感神经之内，因此利用外科方法难以实现窦房结传入

6、神经的去除.同时窦房结神经的心外走向的复杂性和不确定性为A：假手术组大鼠窦房结区H4染色FITC标记（绿色）；B：箭头所指处为假手术组大鼠窦房结区CGRP染色FITC标记（绿色）；C：箭头所指处为假手术组大鼠窦房结区SP染色FITC标记（绿色）；D：去神经组大鼠窦房结区H4染色TRITC标记（红色）；E：去神经组大鼠窦房结区CGRP染色FITC标记（绿色）；F：去神经组大鼠窦房结区SP染色FITC标记（绿色）.　　在心外神经段去除窦房结的传入神经来研究其对心血管功能和窦房结功能的影响造成一定的难度

7、.近来Dainius等［2］发现了上腔静脉根部区域为支配窦房结的神经进入窦房结的必经之路，为在心脏表面利用化学方法去除窦房结传入神经的创造了机会.心脏的神经位于心外膜内，同时在心脏传入神经上发现了有VR1受体（辣椒素特异性受体）［5］.辣椒素亲脂性强，组织吸收好.心脏外膜表面应用辣椒素同样可以实现传入神经的去除.Matthean等［7］在上腔静脉和右心房的交界处心外膜上局部灌注辣椒素选择性的去除传入神经来研究辣椒素敏感性传入神经和局部的牵拉作用在心房利钠肽分泌过程中的作用.我们采用心脏上腔静脉根部

8、区域外膜表面应用辣椒素的方法去除辣椒素敏感性窦房结传入神经，浓度为10g/L.此浓度为反复试验的结果.我们发现浓度为5g/L亦可以去除辣椒素敏感性传入神经但是结果不稳定.我们在试验中应用的浓度10g/L可以较稳定的去除窦房结辣椒素敏感性传入神经.　　　　通过传入神经递质的检测证实传入神经的去除具有高敏感性，可靠性等特点.SP和CGRP是窦房结重要的传入神经递质，两者共表达于窦房结的传入神经纤维中［8］.Marta等［9］在研究辣椒素敏感性传入神经对用阿霉素建立的心肌病模型大鼠心衰发