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1、导入Leafy-ipt基因高羊茅草抗逆性的研究StudyontheresistanceofFestucaarundinaceaSchrebbytransferedtheLeafy-iptgene学科专业:生物工程硕士生:刘付校内指导教师:卢文玉副教授企业指导老师:张烜明高级工程师天津大学化工学院二零一七年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢之处外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得天津大学或其他教
2、育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:签字日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津大学有关保留、使用学位论文的规定。特授权天津大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。(保密的学位论文在解密后适用本授权说明)学位论文作者签名:导师签名:签字日期:年月日签字日期:年
3、月日摘要本论文是利用调控花分生组织启动的leafy-ipt基因导入高羊茅中。通过对转基因植株的生化检测、生物学形态指标观察和生理指标检测,考察转基因植株在生物性状、开花后各抗性指标、延缓植株衰老性状,以及观赏性等方面的特征。建立了高羊茅草的再生体系,利用基因枪将Leafy-ipt基因成功导入高羊茅草体内并通过分子植物学方法快速鉴定了45个抗转基因材料植株,通过PCR检测获得了11个阳性的高羊茅草转基因材料植株。在从11个阳性的高羊茅草转基因材料中,继而利用分子杂交,获得10个阳性材料。通过初步的干旱
4、胁迫,筛选了6个具有抗旱能力的株系,作为后续的试验材料。并通过对6个高羊茅草转基因株系叶长、叶宽、叶片质地、冠径、株高、穗长、抽穗数和分蘖数等生物性状的研究发现:转基因株系Pi1、Pi4和Pi5适合于建造草坪。Pi6可用于彩色草拼接色。通过对6个转基因株系叶绿素含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、SOD活性、POD活性、MDA含量、脯氨酸含量7个生理指标研究表明:转基因株系中Pi4、Pi5、Pi2、Pi6抗逆性能良好。关键词:高羊茅草、Leafy-ipt基因、生理指标、转基因IABSTRACTThi
5、spaperisanintroductionoftheiptgene,whichisactivatedbytheregulationofthefloweringmeristem.Biochemicaltestingofthetransgenicplants,biologicalmorphologyobservationandphysiologicalindexdetection,transgenicplantsinbiologicaltraits,theresistantindexafterflow
6、ering,plantsenescence,andornamentalcharacteristics.Theestablishmentofregenerationsystemoftallfescue,usinggenegunLeafy-iptgenewassuccessfullytransfectedinvivoandtallfescuebymolecularbotanymethodfortherapididentificationof45transgenicplantsresistantmater
7、ials,detectedbyPCRobtained11positivetransgenictallfescueplants.In11positivetransgenictallfescue,thenusingmolecularhybridization,obtained10positivematerials.6droughtresistantstrainswerescreenedasthefollowingexperimentalmaterialsthroughpreliminarydrought
8、stress.Andthroughthestudyof6tallfescuetransgeniclinesleaflength,leafwidth,leaftexture,crowndiameter,plantheight,paniclelength,headingnumberandtillernumberofbiologicaltraitsshowedthattransgeniclinesPi1,Pi4andPi5suitablefortheconstruction