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1、口腔鳞状细胞癌肿瘤血管形成与细胞凋亡的关系作者：陈江,温玉明,李龙江,王昌美【关键词】,细胞凋亡;,新生血管化,病理性;,癌,鳞状细胞;,抗原,CD34;,口腔肿瘤 摘要:目的探讨口腔鳞状细胞癌凋亡与肿瘤血管生成的关系。方法60例口腔鳞状细胞癌组织为恶性组,10例口腔良性肿瘤为良性组,10例正常人牙龈组织作为正常组,观察口腔鳞状细胞癌的凋亡指数(AI)与癌灶内微血管密度(IMVD)的关系。肿瘤癌灶内IMVD的检测采用CD34抗原SP免疫组织化学染色;凋亡检测采用DNA原位末端标记检测法(TUNEL法)。结果3组IMVD差别有统计学意义
2、;TNM分期与IMVD有关;IMVD与口腔鳞状细胞癌的颈淋巴结转移有密切的关系。恶性组AI低于正常组及良性组(P<0.01),而正常组与良性组之间差别则无统计学意义(P>0.05)。TNM分期与AI有关;颈淋巴结转移与AI无明显相关。结论口腔鳞状细胞癌的IMVD不仅与肿瘤的TNM分期、分化程度、颈淋巴结转移有关,而且与其AI也有密切的关系。 关键词:细胞凋亡;新生血管化,病理性;癌,鳞状细胞;抗原,CD34;口腔肿瘤 细胞凋亡是活体细胞独特的生物学特征,其调节的失衡是细胞癌变的分子机制之一。实体瘤组织中富有微血管网络,供
3、给肿瘤细胞养分和氧气。肿瘤组织的血管生成是肿瘤赖以增殖和转移的重要条件之一。口腔鳞状细胞癌(鳞癌)的组织中血管丰富,其细胞凋亡与肿瘤血管生成之间可能有一定的关联。笔者探讨口腔鳞癌的凋亡与癌灶内微血管密度(intratumoralmicrevesseldensity,IMVD)的关系,进而了解两者在肿瘤发生发展过程中的作用。 1材料与方法 1.1病例选择60例口腔鳞癌的组织切片标本为恶性组,男性38例,女性22例,年龄(45±6.5)岁(38~64岁)。其中舌癌20例,颊癌20例,口底癌10例,牙龈癌10例。按TNM临床分期,Ⅰ期7例
4、,Ⅱ期15例,Ⅲ期23例,Ⅳ期15例。其中颈淋巴结转移者31例,无颈淋巴结转移者29例。按鳞癌病理分级法进行病理分级,其中高度分化的20例,中度分化的12例,低度分化的28例。另外选择10例口腔良性肿瘤为良性组,10例正常人牙龈组织作为正常组。 1.2材料单克隆CD34抗体SP试剂盒、原位细胞凋亡检测试剂盒(福州迈新生物技术有限公司)。 1.3方法 1.3.1IMVD检测采用CD34抗原SP免疫组织化学染色,第一抗体选用单克隆CD34抗体,方法参照 2结果 2.1CD34表达恶性组可见血管内皮细胞质中CD34点状分布,呈褐色;
5、正常组及良性组则仅见黏膜下少量微血管散在分布。恶性组的鳞癌组织中IMVD明显增多,集中分布于细胞增殖旺盛区域的间质内(图1)。 2.2凋亡细胞表达正常组凋亡细胞多分布于上皮的表层细胞层内,散在不均匀,呈蓝色;良性组除了在上皮的表皮细胞层有阳性细胞分布外,在棘细胞层内也有散在分布;而恶性组则多分布在癌巢中(图2)。 2.3组织内IMVD及AI的比较见表1。 图1口腔鳞状细胞癌CD34阳性的肿瘤血管表达(SP染色×400)（略） Fig1ImmunohistochemicalstainingofCD34inoralsquamousc
6、ellcarcinomas 图2恶性组凋亡细胞在癌巢分布(TUNEL法×400)（略） Fig2TUNELstainingfromoralsquamouscellcarcinomasshoalesion 表13组标本组织内癌灶内微血管密度及凋亡指数的比较（略） Tab1Thecorrelationofintratumoralmicrevesseldensityandapoptosisindexinthreegroups 与正常组比较,☆:P＜0.05；与良性组比较，△：P＜0.05. 2.4不同临床分期的IMVD及AI分布见
7、表2。 表2不同临床分期的癌灶内微血管密度及凋亡指数分布（略） Tab2IMVDandAIindifferentclinicstagesTNM 与Ⅰ期比较,☆:P＜0.05；与Ⅱ期比较，△：P＜0.05. 2.5颈淋巴结转移与IMVD及AI的关系见表3。 表2颈淋巴结转移与癌灶内微血管密度及凋亡指数的关系（略） Tab2IMVDandAIincervicallymphaticmetastasispositiveornegative 与阳性组比较,☆:P<0.05. 2.6口腔鳞状细胞癌IMVD与AI的关系将35例凋
8、亡细胞阳性的口腔鳞状细胞癌病例的IMVD与其相应的AI绘制成散点图,显示两者呈反向相关的直线趋势(图3)。经统计学分析,相关系数及回归系数具有统计学意义(P<0.01)。相关系数:-0.8006(P&
