大鼠外伤性白内障晶状体上皮细胞中mmp2和timp2的表达

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1、大鼠外伤性白内障晶状体上皮细胞中MMP2和TIMP2的表达：石云峰，王峰，谢志，张爽，廖伟【摘要】　　目的：探讨基质金属蛋白酶2（matrixmetalloproteinase2，MMP2）及其抑制剂（tissueinhibitorofmetalloproteinase2，TIMP2）在大鼠外伤性白内障形成过程中所发挥的作用。方法：正常成年SD大鼠20只，体质量250～300g，建立单眼晶状体穿通伤后外伤性白内障模型，并随机分为伤后12，24，72，168h4个时相组。用免疫组织化学染色法检测MMP2和TIMP2在各组晶状体

2、上皮细胞（lensepithelialcell,LEC）中的表达情况。结果：外伤后12h晶状体开始出现混浊，并随时间延长而加重。MMP2在各外伤组LEC中均有较强的阳性表达，而在正常对照眼中无表达。TIMP2的表达在各组LEC中差异均无显著意义（P>0.05）。MMP2与TIMP2阳性表达率间无相关性（P>0.05）。结论：MMP2参与了外伤性白内障形成的病理环节。MMP2和TIMP2表达失衡在外伤性白内障的发生和发展过程中发挥重要作用。【关键词】基质金属蛋白酶2；基质金属蛋白酶2抑制剂；外伤性白内障；晶状体上皮

3、细胞　　AbstractAIM:Toinvestigatetheexpressionandsignificanceofmatrixmetalloproteinase2(MMP2)andtissueinhibitorofmetalloproteinase2(TIMP2)intherattraumaticcataractmodels.METHODS:Taticcataractmodelonlefteyesandthendividedintoposttraumatic12,24,72and168hoursgroupsrandomly.T

4、heexpressionofMMP2andTIMP2inlensepithelialcells(LEC)inedbyimmunohistochemistrystaining.RESULTS:Intheposttraumatic12hours,lensopacitybegantoappearandaggravatedasthetimemunohistochemicalresultsshoaticgroups.NoexpressionofMMP2ationprocessoftraumaticcataract.Theimbalancebet

5、ayplayacriticalroleinthegenerationanddevelopmentoftraumaticcataract.　　KEYMP2）是降解细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）和基底膜的一类重要酶类，金属蛋白酶组织抑制剂2（tissueinhibitorofmetalloproteinase2,TIMP2）是MMP2的特异性抑制物，ECM的稳定主要依赖于MMP/TIMP间的动态平衡。MMP/TIMP系统在多种眼科疾病中所起的作用是近年来的研究热点。外伤性白内障是眼球发生穿孔伤或钝挫伤后常

6、见并发症之一，发病率为36%～52%，也是眼外伤致盲的主要原因之一，占视力致残者的28.1%。许多研究表明机械性损伤引起的晶状体上皮细胞（lensepithelialcell，LEC）增生、移行和化生与外伤性白内障的发生发展密切相关，但目前尚无MMP2和TIMP2在外伤性白内障中发挥作用的相关报道。我们通过建立大鼠单眼外伤性白内障模型[1]，用免疫组织化学法检测外伤性白内障LEC中MMP2/TIMP2的表达情况。　　1　材料和方法　　1.1　材料　　正常成年SD大鼠20只，雌雄不限，体质量250～300g（哈尔滨医科大学附属第二医院动

7、物实验中心提供）。即用型兔抗大鼠MMP2和TIMP2mAb（福州迈新生物技术有限公司）。SP试剂盒和DAB显色剂（北京中杉金桥生物技术有限公司）。免疫组化步骤按SP试剂盒操作。以PBS代替一抗作为阴性对照，阳性对照为购自福州迈新公司的标准阳性对照片。　　1.2　方法　　SD大鼠左眼进行人为外伤制造外伤性白内障，对侧眼作为对照。5g/L托品酰胺扩瞳，5g/L氯胺酮按10mL/kg比例ip麻醉，5g/L利多卡因滴眼，在手术显微镜下用一次性1mL注射器针头在角膜偏中央部位刺穿角膜，并用针头将晶状体前囊划开1.0mm×1.5mm切口，自晶状体中央

8、沿前囊创口长轴方向划开数次，术毕结膜囊涂红霉素眼膏，术后每天5g/L托品酰胺扩瞳。术后将大鼠随机分为伤后12，24，72，168h4个时相组，每组5只，在各时间点用