灵芝多糖结构及其组成研究

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1、第30卷，第1期光谱学与光谱分析Vo1．30，No．1，pp123—1272010年1月SpectroscopyandSpectralAnalysisJanuary，2010灵芝多糖结构及其组成研究何晋浙，邵平，倪慧东，柴能杰，孙培龙浙江工业大学生物与环境工程学院食品系，浙江杭州310032摘要采用沸水回流法从赤灵芝子实体中提取多糖，经Sevage法除蛋白，乙醇沉淀，离心、流水透析、浓缩、冻干后得灵芝多糖，单糖经乙酰化处理进行外标法定量，并利用苯酚一硫酸法、紫外、红外及x衍射光谱法、凝胶分子排阻色谱一蒸发散射检测器法、气相和气质谱色谱法进行多糖组分、含量、结构和分子量分析研究，结果表明

2、：灵芝多糖为米黄色，得率为2左右，其含量≥43，红外光谱显示灵芝多糖结构主要为糖甘键连接的吡喃型葡聚糖，其多糖的主要单糖组分为葡萄糖，含量为89左右，并含有其他少量的单糖组分I)_阿拉伯糖、I)_木糖、【)_甘露糖、I)_半乳糖。其多糖主要为同均糖，多糖为非晶型结构，分子量主要分布在8×10～2×10之间，分子质量主要为2×10的生物大分子。关键词灵芝多糖；结构；单糖组分；分子量中图分类号：0657．3；R932．1文献标识码：ADOI：10．3964／j．issn．1000—0593(2010)01—0123—05规格：3Om×320Fm×0．25Fm)，检测器为火焰检测器引言(FI

3、D)，FinnigantraceDSQII气相色谱质谱联用仪(美国热电)，毛细管色谱柱：DI3-1。X’PertProX射线衍射仪(荷兰灵芝为多孔菌科真菌赤芝，是一种珍贵的药食两用帕纳科公司)，液相色谱为美国Water公司生产，蒸发散射菌_1．z]。近年来，随着人们的保健意识提高，对食品的优质检测器(ELSD)(CHROMACHEM，美国ESA)，凝胶色谱柱化、营养化、保健化的要求越来越迫切。尤其由于灵芝的营为ShodexOHpakSB-804HQ，SB-805HQ。养成分丰富且营养价值高，含灵芝的食用保健品热已在我国1．2主要试剂及东南亚国家悄然兴起。通过对灵芝的活性成分深入研究，灵

4、芝原料主要购于浙江金华寿仙谷药业有限公司和浙江其中的灵芝多糖是灵芝的主要有效成分之一，具有多种药理益圣菌物发展有限公司，灵芝品种均为赤芝，由椴木栽培。学活性l3。]。灵芝多糖具有抗肿瘤、提高免疫、护肝、降血9种标准单糖分别为：【)_葡萄糖，I)I木糖，I)-阿拉伯糖，糖、降血脂、抗氧化镇痛和延缓衰老等作用，被认为是灵芝【)_半乳糖，I)_甘露糖，L厂鼠李糖，山梨糖，I)I木糖(均购自扶正固本的重要有效成分_8]。而灵芝多糖的结构及组成与上海源聚科技有限公司)，L-岩藻糖、系列标准葡聚糖为Mw其活性功效组分密切相关[7]。本次实验主要由紫外光谱，红(5×i0，8×10，1．5×10，1．

5、8×10和4×10)，购自德外光谱、X射线衍射、色谱对灵芝多糖的结构、单糖组分及国Merck公司进口试剂，衍生化试剂与样品溶剂醋酐，硼氢分子量分布进行了分析研究，以促进灵芝多糖活性组分的品化钠(NaBH)，甲醇，无水硫酸钠，氯仿均为国产分析纯试质评价和与药理营养保健相关性的研究。剂。1．3灵芝多糖的提取纯化1实验部分分别称取60g经干燥粉碎的3种灵芝子实体原料GL1，GL2，GL3，按料液比1：10在沸水浴下分别回流2h，取上1．1主要仪器层清夜，残渣反复提取3次，合并上清液，真空浓缩。并以UV2450紫外分光光度计(日本岛津)；Nicolet6700型红Sevage法除蛋白，在每10

6、0mL的浓缩液加20mL的氯仿正外光谱仪(美国尼高力公司)；美国Agilent6890N气相色谱丁醇液4：1(氯仿：正丁醇)，剧烈震荡30min，以4000r·仪，毛细管色谱柱：DB-1701(主要成分：14％甲基硅氧烷，s的速率离心15min，取上层清夜加无水乙醇到溶液含量收稿日期：2009—01—16，修订日期：2009—05—02基金项目：国家高技术研究发展计划“863”项目(2O07AA1Oz337)和浙江省科技厅项目(2oo8C32O3O)资助作者简介：何晋浙，女，1959年生，浙江工业大学生物与环境工程学院副研究员e-mail：hjzgd@zjut．edu．cn*通讯联系人

7、e-mail：sunpeil@t63．com124光谱学与光谱分析第3O卷达95，静置过夜，收集沉淀物，再依次用95乙醇、乙醚、10mL。在200~400nm区间进行紫外光谱扫描(见图2)。图丙酮洗涤各两次，得粗多糖在截留分子量1．4×10的透析中3种灵芝多糖均在260~280处有明显的弱峰，由一跃袋中流水下透析24h，以乙醇沉淀提取，冷冻干燥制得灵芝迁引起的R吸收带，说明该化合物中可能存在醛基和羰基，多糖。可能是多糖的1个紫外特征吸收峰，这与