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1、微生物学通报AUG20,2009,36(8):1212~1216Microbiology©2009byInstituteofMicrobiology,CAStongbao@im.ac.cn研究报告瑞拉菌素产生菌RL-2的诱变育种*苟丽霞安德荣刘双发李晶(西北农林科技大学植物保护学院陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100)摘要:本研究以委内瑞拉链霉菌秦岭变种RL-2(Streptomycesvenezuelaevar.qinlingensisRL-2)为出发菌株,分别采用紫外线、氯化锂及紫外线加氯化锂的复合诱变
2、方式对其孢子悬液进行诱变处理。在复合诱变的紫外线照射时间为45s和氯化锂浓度为0.4%的情况下,获得一株瑞拉菌素的高产突变菌株UVL-108且连续传接6代其遗传特性较稳定。采用双向培养及生长速率法对其进行初筛和复筛,结果表明:UVL-108的拮抗性能较出发菌株提高了77%,其发酵液对稻瘟病菌的抑菌毒力是出发菌株的3倍。关键词:链霉菌,诱变,瑞拉菌素,拮抗性能MutationalScreeningofZuelacmycin-producingStrainRL-2*GOULi-XiaANDe-RongLIUShuang-Fa
3、LIJing(CollegeofPlantProtectionandShaanxiKeyLaboratoryofMolecularBiologyforAgriculture,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China)Abstract:Inthisresearch,thezuelacmycin-producingstrainStreptomycesvenezuelaevar.qinlingensisRL-2wasusedasoriginalstrain,thes
4、poresuspensionofwhichwasinducedbyUV,LiClandthecompoundtreatmeat(UV+LiCl)respectively.Thezuelacmycin-high-yieldstrainUVL-108wasobtainedbythetreat-mentthattheexposuretimeunderUVirraditionwas45sandtheconcentrationofLiClwas0.4%.Thehe-reditycharactersofmutantUVL-108we
5、restableinsuccesivesixgenerations.TheantibacterialactivityandthefermentationtiterofmutantUVL-108weredetermindedbybidirectionedcultureandmyceliallineargrowthrespectively.TheresultsdemonstratedtheantibaterialactivityofmutantUVL-108wasimprovedby77%,andtherelativetox
6、icityoffermentationtoPhyriculariagriseawasimprovedbytwotimescomparedwiththeoriginalstrain.Keywords:Streptomyces,Mutagenesis,Zuelacmycin,Antibaterialactivity瑞拉菌素是西北农林科技大学植物病理实验室菌的新变种。经过二十多年的研究,已在瑞拉菌素和西安海浪生物研究所自主开发的一种新型氨基糖的生物活性、理化性质、菌株鉴定、抑菌谱、发酵苷类农用抗生素。其产生菌RL-2菌株是本实
7、验室从工艺、分离纯化、分子结构等方面取得很大进展。1988年起通过对秦岭山区原始森林土壤中放线菌资实验证明瑞拉菌素对稻瘟病菌、小麦赤霉病菌、黄[1-3]源进行研究,从中筛选分离的对植物真菌病害有明瓜枯萎病菌和番茄枯萎病菌等有强拮抗作用。但显抑制作用的一株放线菌,该菌株是委内瑞拉链霉RL-2野生型菌株产素能力很低,不能直接作为生产基金项目：国家863计划项目(No.2007AA021503)*通讯作者：:anderong323@163.com收稿日期：2008-11-26;接受日期：2009-02-10苟丽霞等:瑞拉菌素产
8、生菌RL-2的诱变育种1213菌种,从而限制了对它的进一步研究和利用。从工氯化锂对孢子液的处理结果,确定复合诱变中紫外业生产的角度来说,选育效价高、稳定性好的优良线和氯化锂的诱变剂量,将紫外线照射后的孢子悬菌株是抗生素筛选过程中的基础工作之一,而菌种液稀释后涂于含氯化锂的平板,28°C避光培养7d。的改良工作是提高产
