玉米矮花叶病毒源鉴定和受侵叶片的超微结构

《玉米矮花叶病毒源鉴定和受侵叶片的超微结构》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、维普资讯http://www.cqvip.com幻一7第20卷第2期西北农业-大学学报VO【20No21992年5月ActaUniv．AgricBorealioccidentalisMav【992玉米矮花叶病毒源鉴定和受侵叶片的超微结构●安德荣魏宁生慕小倩项喻马远莉r——————一————一lI北农业大学植保系，2北农业^学基础部陕杨陛·7I2100)3陕西省农科院电镜室陕西枷陵7I2I∞摘要利片j生物接种血清学反应和电子显微镜观察等方法，对大田发生的玉米矮花叶病毒源进行了鉴定。利用超薄切片系统研究r=叵米受MDMV侵染后超微结构的变化。在细胞质中观察到J札轮状卷叶状、束状、圆柱

2、状内岔体和简单的囊拖到高度卷曲的膜系统受侵细胞产生陌种不同类型的胞问连丝，a型为正常胞间连丝，b型的胞问连丝伸出指状突起、这可能是细胞限制病毒在寄主体内运转的一种结构。壁旁体的出现寄主细胞壁加厚及封闭胞问连丝有关。关键词墨丝堕·病考血清学反应胞间违丝、塑堂§控中图分类号$432．41，$43223，$435I3141962年Williams等“在田间发现了玉米矮花叶病，于1965年首次报道r玉米：的这种新病毒，并定名为玉米矮花叶病毒(MDMV)。至70年代该病已蔓延成为世界范围内的主要病害。1980年甘肃农科院朱福成等。在国内对玉米矮花叶病的鉴定危害及其防治作了首次报道本文在对杨

3、陵区玉米矮花叶病毒源进行鉴定的基础上，系统研究了玉米受侵叶片超微结构的变化，为搞清寄主一病毒之间的相互关系及研究寄主的抗病性机制提供参考依据l材料与方法●生物接种将鉴别寄主玉米(陕单七号)和高粱(熊岳191)分别播人口径8～10cm的花盆内，每盆3株置防虫温室中培育，出苗后15d左右开始接种。介体蚜虫为保持在普通烟上的无毒桃蚜。采集杨陵区田间发病的新鲜病叶，剪碎后，在研钵中加少量磷酸盐缓冲液(0．05mol／LPBS，pH70)和金钢砂充分研磨，用手蘸取病叶液摩擦接种在鉴别寄l丰上，与此同时，用无毒桃蚜(Myz~spersicae)在新鲜病叶上饲毒10rain后，转移到玉米和高粱

4、上，每株接蚜虫10头，传毒饲育10min后，先用毛笔挑出蚜虫，随后喷杀灭菊酯进一步灭蚜。将用两种方法接种后的植株都放在20～25℃的防虫温室中培养。血清学测定为了进，·步鉴定该病原，用田间和温室中的病汁液分别和4种抗血清进行琼脂双扩散试验(1％的琼脂糖溶解于PBS缓冲液中)。这4种抗血清为玉米矮花叶文稿收到日期l991—04—27围家自然科学基盘资助项l维普资讯http://www.cqvip.com68北农业大学学丰鹾第20卷病毒(MDMV1．甘蔗花叶病毒(SCMV)、商梁钉：条纹病毒(SRSV)．~H大麦黄矮病毒(BRDV)抗血清，均由德国农林生物研究中心病毒所W．Hnth博

5、士提供。电镜观察片{直接制片法格病升液滴在铺有Format膜的铜网上，吸附5rain后．以双重蒸溜水冲洗l0滴．用滤纸吸千，再加2％的磷钨酸钾(PTA)负染4rain．吸去多余液体燥后立即在JEM一100CxⅡ型电镜下透射观察。超微结椅观察为MDMV只出现在薄壁组织细胞中，所以将不同时期的病叶●去掉粗叶脉后，采刚常规方法固定、脱水、提透、包埋．切片用醋酸双氧铀和拧撩酸铝将切片双重染色后．嚣JEM一100C×Ⅱ型电镜F观察并照相。2结果2．1MDMV的鉴定将病叶通过汁液摩擦接种和蚜虫非持久性接种后，在玉米上表现为斑驳和褪绿条纹，在高梁上表现为红色条斑，蚜虫可进行非持久性传毒，这些特

6、性都初步表明所测毒源为MDMV用田问和温室的病汁液分别与MDMV，SCMV．SRSV，BYDV的抗血清进行琼脂双扩散试验表明，该毒源仅和MDMV抗血清有明显的融合沉淀线，进一步确定所测毒源为MDMV．病汁液在电镜下可观察到弯曲线状的病毒颗粒，大小约700iom×14nm(圈I-13o综上所述，田问所采毒源为MDMV，属马铃薯Y病毒组成员2．2受侵细胞的超微结构变化MDMV在受侵细胞中的内含体电镜观察受侵叶片的超薄切片，在细胞质中看到了大量分散分布和排列成束状的病毒粒子(图I—同时还有各种内含体(图卜3)．有胍轮状(Pinwheels)、卷叶状(Scrol1)、束状(bundle)

7、和圆柱状(Cylindrica1)。这些内含体的不同形状主要是由丁=内台体在细胞质中存在的位置同或被切片的方向不同而形成的。一般来讲，在纵切片．常可看到束状和圆柱状，而在横切片上则为风轮状和卷叶状。两种不同类型的细胞连丝超薄切片在电镜F观察到许多胞闻连丝平行而密集地排列在一起，这种现象基本【：可分为两种类型：a型胞问连丝，直接连通细胞壁和细胞质嗔(图I—4)．表现出lF常胞阃连蝗的特征；b型胞连丝伸出指状突起，不与细胞质膜相连通(图t-5，6)。壁旁体和卷曲的膜系统在细胞壁与细胞