狂犬病病毒elisa抗体检测试剂盒等

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1、附件2（略）附件3（略）附件4狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒等6种兽药产品说明书和标签一、狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书和标签（一）狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书兽用【兽药名称】通用名狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒商品名无英文名ELISAKitForRabiesVirusAntibodies汉语拼音KuangquanbingduELISAKangtiJianceShijihe【主要成分与含量】试剂规格数量抗原包被板96孔/块1块羊抗犬IgG酶标抗体0.5ml/瓶1瓶质控阳性血清0.5ml/瓶1瓶质控阴性血清0.5ml/瓶1瓶参考血清0.5ml/

2、瓶1瓶样品稀释液30ml/瓶1瓶酶标抗体稀释液20ml/瓶1瓶20倍洗涤液20ml/瓶1瓶底物A液7ml/瓶1瓶底物B液7ml/瓶1瓶终止液7ml/瓶1瓶【性状】试剂盒的外包装应洁净、无破损，标签应符合国家有关规定，内包装应无破损、无裂痕、无渗漏，品名、批号、保存条件、有效期和合格证清晰。（1）抗原包被板（96孔板）无色透明，干燥，无杂质吸附，装量为1块。（2）羊抗犬IgG酶标抗体无色或淡黄色澄明或半透明液体，装量为0.5ml，1瓶。（3）质控阴性血清疏松状淡黄色团块，1瓶。（4）质控阳性血清疏松状淡黄色团块，1瓶。（5）参考血清疏松状淡黄色团块，1瓶。（6）样品稀释液淡

3、黄色透明液体，装量为30ml，1瓶。（7）酶标抗体稀释液淡黄色透明液体，装量为20ml，1瓶。（8）20倍浓缩洗涤液无色透明液体，装量为20ml，1瓶。（9）底物A液无色透明液体，装量为7ml，1瓶。（10）底物B液无色透明液体，装量为7ml，1瓶。（11）终止液无色透明液体，装量为7ml，1瓶。【作用与用途】用于酶联免疫吸附试验，检测犬血清中的狂犬病病毒IgG抗体。【用法与判定】1需要自备的材料去离子水或生理盐水、可调移液器、1000ml的量筒、酶标仪、37℃温箱。2预备步骤2.1做好质控血清、参考血清（或OIE狂犬病阳性参考血清）和待检样品的版面布置和记录。2.2质控

4、阳性血清、质控阴性血清的稀释用0.5ml样品稀释液复溶质控阳性血清和质控阴性血清，并作10倍系列稀释至1:100。2.3参考血清的稀释用0.5ml样品稀释液复溶参考血清，按照下述稀释方法得到标准曲线，先将参考血清稀释至0.4EU/ml，再进行1:10稀释至0.04EU/ml，在此基础上进行2倍稀释，即得到下述梯度参考血清：0.04EU/ml，0.02EU/ml，0.01EU/ml，0.005EU/ml，0.0025EU/ml，0.00125EU/ml，0.000625EU/ml（如使用参考血清为OIE狂犬病阳性参考血清，按上述稀释方法稀释至0.04IU/ml，0.02IU

5、/ml，0.01IU/ml，0.005IU/ml，0.0025IU/ml，0.00125IU/ml，0.000625IU/ml）。2.4待检血清稀释将待检血清10倍系列稀释至1:100。3检测步骤3.1对照血清和样品的加样将稀释好的不同效价的参考血清、质控阴性血清、质控阳性血清和待检样品按照版面布置加入板孔内，100μl/孔，对照血清和样品分别作2孔重复。3.2孵育37℃恒温培养箱内孵育30分钟。3.3洗板用去离子水将浓缩洗涤液进行20倍稀释备用，弃掉板孔内液体，加洗涤液，200μl/孔，洗涤5次，甩干。3.4加酶标抗体用酶标抗体稀释液按照1:100稀释酶标抗体，100μ

6、l/孔。3.5孵育37℃恒温培养箱内孵育60分钟。3.6洗板弃掉孔内液体，加洗涤液，200μl/孔，洗涤5次，甩干。3.7显色底物A、B液等体积混合，每孔加100μl。3.8孵育37℃恒温培养箱内避光孵育20分钟。3.9终止向每个酶标板孔中加入终止液50μl。3.10检测在酶标仪上设置波长为450nm条件下测出OD450nm值。4结果判定4.1当质控阳性血清OD450nm值≥0.6，质控阴性血清OD450nm值≤0.1，且当ln(参考血清OD450nm值)与ln（参考血清中狂犬病病毒抗体滴度）之间的相关系数（R）不小于0.95时，试验结果才有效。4.2检测结果的计算4.2

7、.1计算各稀释度参考血清(从4EU/ml至0.0625EU/ml，不考虑其1:100稀释)的平均OD450nm值，及平均OD450nm值的对数值(ln)。4.2.2计算各稀释度参考血清抗体滴度的对数值(ln)(从4EU/ml至0.0625EU/ml，不考虑其1:100稀释)。4.2.3将上述两组对数值(ln)代入Excel表中，点击图表类型中“XY散点图”，以各稀释度参考血清抗体滴度（不考虑其1:100稀释)的对数值为X轴，以各稀释度参考血清样品平均OD450nm值的对数值为Y轴，并点击图上任意散点，右键菜单中点击添加趋势线，