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1、毛细管电泳法手性拆分橙皮苷对映体2022006,Vo1.27,No.05※毛细管电泳法手性拆分橙皮苷对映体周洁宇,章狮玮,许学书水,卢艳花,魏东芝(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237)摘要:通过考察电泳缓冲液pH,环糊精种类和浓度,有机溶剂浓度及操作电压和温度对分离的影响,建立了一种简便快捷的高效毛细管电泳拆分橙皮苷对映体的方法.实验结果表明,以12mmol/L的羟丙基一B一环糊精为丁性选择剂,200mmol/L的硼酸,甲醇(V-V=7:3,pH9.7)为电泳缓冲溶液,23kV的分离电压,在3o"cT使橙皮苷对映体达到基线分离,分离度为1.5O.分析
2、方法快速简单.关健词:毛细管电泳;橙皮苷;羟丙基一B一环糊精:手性分离ChiralSeparationofHesperidinbyCapillaryElectrophoresisZHOUJie—yu,ZHANGChong—wei,XUXue—shu,LUYan-hua,WEIDong—zhi(StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering,EastChinaUninersityofScienceandTechnology,Shanghai200237,China)Abstract:Asimpleconvenientandrapidmeth
3、odofcapillaryelectrophoresisfortheseparationandanalysisofthechiralhesperidinenantiomerswasestablished.Theeffectsofdifferentchiralselectorsandmeirconcentration,bufferpHanditsconcentration.methanolconcentration,andvoltageandtemperatureontheseparationofchiralhesperidinenantiomerswerestudied.T
4、heoptimizedconditionswel'c:12mmol/Lofhydroxypropyl—fj—cyclodextrin,200mmol/Lofborate—methanolsolutionmratioof7:3andpH9.7atseparationvoltage23kVandtemperature30~C.Thebaselineseparationofhesperidinenantiomersisachievedwitharesolutionfactorof1.50.Keywords:capillaryelectrophoresis;hesperidin:h
5、ydroxypropyl—B-cyclodextrin;chiralseparation中图分类号:0658文献标识码:A文章编号:1002—6630(2006)05.0202—04橙皮苷是一种广泛存在于柑橘类水果中的类黄酮物质,属双氢黄酮糖苷类化合物.柑橘皮中的橙皮苷成分有加强毛细血管,降低血压,抗过敏,降低低密度胆固醇,影响血压,改变体内酶活性,改善微循环,抗菌,抗肝炎,抗氧化,抗肿瘤,抗癌等生理功能,有很高的药用价值.在欧洲,它被用于制作治疗慢性血管疾病的口服药物fl,21.其结构式如图1.近年已有关于橙皮苷对映体分离的报道,如MonikaAszternborskat
6、1等,用胶束毛细管电泳(MEKC)的方法,对橙皮苷对映体进行了拆分,但分离度不高,操作比较繁琐.NuriaGel—Moreto[41等采用15mmol/L的BCD与0.1mmol/L的4.磺丁基醚.B—CD钠盐(SBE一13一CD)混合环糊精体系,分离了甜橙果汁中的橙皮苷对映体,但是分析时间较长,且试剂难以获得.本文拟用毛细管电泳的方法,通过选择不同的环糊精,加入一定量的HO圉1橙皮苷的结构式Fig.1Molecularstructuresofhesperidin有机溶剂,优化分离条件,以获得一种操作简单,成本低,分离效果满意的方法.1材料与方法收稿日期:2005—06-2
7、9通讯作者基金项日:生物工程上海市重点学科建设项目作者简介:周洁宇(1979-),男,硕士研究生,主要从事毛细管电泳法的研究.※2006,Vo1.27,No.052031.1仪器与方法BeckmanMDQ型电泳仪,配有DAD检测器(Beckman公司,美国),石英毛细管柱60cm×50m(i.d.),有效长度50cm(河北永年光导纤维厂),CyberScan510型精密酸度训(EutechInstrumentsPteLtd新加坡).B一环糊精(B?CD),Y-环糊精(Y—CD),二甲基B.环糊精(DM.B—CD),