两种诊断儿童幽门螺杆菌感染的方法比较

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1、两种诊断儿童幽门螺杆菌感染的方法比较【摘要】　　目的探讨14C-尿素呼吸试验（14C-UBT）和幽门螺杆菌抗原快速试卡（HpSA）检测儿童患者幽门螺杆菌（Hp）感染的应用价值。方法对68例因上消化道症状接受胃镜检查的儿童进行14C-UBT和幽门螺杆菌粪便抗原快速检验，并同时取胃液标本进行FQ-PCR检测，以FQ-PCR检测结果作为金标准，对14C-UBT和幽门螺杆菌抗原快速试验进行初步评价。结果14C-UBT的敏感性、特异性、准确性分别为93.5%，97.3%，95.6%，HpSA的敏感性、特异性、准确性分别为87.1%，100%，94.1%。结论14C-UBT法的敏感

2、性略优于HpSA法，但HpSA法简便易行，易于在实验室推广使用。【关键词】幽门螺杆菌感染抗原检测　　幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)与慢性胃炎、消化性溃疡的关系日益受到重视，HP感染是儿童上消化道炎症，消化道溃疡的重要病因这一。目前，诊断Hp感染的非侵入方法多以14C-UBT为金标准，但此法在低龄儿童中其特异性降低，且收集此类人群的呼出气体困难［1］。幽门螺杆菌粪便抗原(HpSA)是近年来推广应用于临床的一种非侵入方法。本研究采用14C-UBT试验、HpSA抗原检测卡及FQ-PCR检测，探讨14C-UBT试验、HpSA抗原对检测儿童患者Hp感染的

3、应用价值。6　　1资料与方法　　1.1研究对象　　选择2006-03～2008-10在我院因上消化道症状接受胃镜检查的儿童患者68例（全部病例均排除4周内服用过抗生素、铋剂、H2受体阻滞剂和质子泵抑制剂等药物），其中男30例，女38例，年龄3.5～14岁。　　1.214C-UBT检测　　受检者空腹或禁食>3h，用水吞服14C尿素胶囊1粒，静坐15min后往呼气卡内呼气2～5min。当卡上批示窗内片上的颜色由蓝色转为白色时完成采样。将卡插入检测仪进样口，仪器将自动进行检测，显示并打印结果。　　1.3HpSA检测　　采用美国Meridian公司生产的Hp快速免疫检测卡

4、(ImmunocardSTAT!HpSA)，操作步骤如下：取5～6mm直径大小的粪便标本，放入1ml样品稀释液中，充分混匀后，滴加4滴混合液于检测孔内，5min内判读结果。结果判读方法参照试剂盒说明书。6　　1.4FQ-PCR仪器系PE公司的PE7700，HpFQ-PCR试剂盒由上海申友生物技术有限公司提供。核酸提取按试剂盒操作说明书，PCR反应体系设置参见文献［2］：PCR反应液23μl,核酸提取液模板2μl,混匀后6000r/min离心数秒，扩增条件为37℃2min,然后按94℃3min，94℃25S,55℃30s,72℃40s进行40次循环，最后25℃恒温10s。

5、其中荧光激以波长487nm,检测波长525nm。参比品分别设定为3×105，3×106，3×107copy/ml及阴性对照。小于3×107copy/ml的样本为阴性。　　1.5统计学处理以FQ-PCR作为金标准，按照试验评价方法，采用四格表分析，计算出敏感性、特异性、准确性。应用SPSS11.0统计软件，组间计数资料的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.114C-UBT法与FQ-PCR法比较　　见表1。两法检测结果无显著性意义(χ2=0，P>0.05)，14C-UBT的敏感性、特异性、准确性分别为93.5%，97.3%，95.

6、6%。表114C-UBT法与FQ-PCR法比较（略）　　2.2HpSA法与FQ-PCR法比较6　　见表2。两法检测结果无显著性意义(χ2=2.25，P>0.05)，HpS法的敏感性、特异性、准确性分别为87.1%，100%，94.1%。表2HpSA法与FQ-PCR法比较（略）　　3讨论　　目前，Hp感染的诊断方法分为侵入性检查和非侵入性检查，侵入性检查易引起交叉感染，非侵入性检查主要包括14C-UBT和HpSA检查。诊断Hp感染最准确的方法是培养检查，常作为Hp感染诊断的金标准，但细菌培养受条件、技术、细菌本身等因素的影响。而FQ-PCR检测胃液中的Hp与培养法相

7、比，不仅有较高的敏感性、特异性，且能克服传统PCR产物污染带来的假阳性问题［3］。故在本研究中以FQ-PCR检测胃液中的Hp作为金标准。6　　14C-UBT试验是一种高准确性、无创伤的诊断方法，检查相对简单，且敏感性、特异性高，本研究的14C-UBT试验的敏感性93.5%,特异性97.3%,对诊断儿童Hp感染及判断根治Hp效果，随访Hp感染有无反复发作有很好的提示作用。虽然14C是放射性同位素，但由于其辐射剂量低，仍可安全地用于儿童。呼气试验利用的是Hp能产生大量的尿素酶的特性，若胃液中存在金黄色葡萄球菌、变形杆菌、肺炎克雷伯菌等可产生的