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时间:2018-07-31
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1、SUMOProtease产品概述SUMOProtease(SUMO蛋白酶,又称ULP蛋白酶)能够识别并且高效地将SUMO(SmallUbiquitin-LikeModifier)从融合蛋白上切割下来。相对于EK和TEV等蛋白酶的短小识别位点,SUMO蛋白酶能够识别完整的SUMO序列,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于融合蛋白切割后用Ni-NTA(产品货号:PAN001)去除。SUMOProtease是自E.coli表达经亲和纯化的重组蛋白酶。酶活
2、性单位定义在30℃条件下反应1小时,能够切割5µg的反应底物达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。溶液成分SUMOProtease储存液10XCleavageBuffer25mMTris-HCl,pH8.0500mMTris-HCl,pH8.0150mMNaCl10mMDTT50µMDTT20%(V/V)Glycerin通善SUMOProtease推荐反应体系反应物组成体积SUMO融合蛋白100µgSUMOProtease2µl(10U/µl)10XSUMOProteaseBuffer10µlddH2O至100µl不同温度下的参考反应时间:1.4℃反应15~16小时2.16℃反应4
3、小时3.25℃反应1.5小时4.30℃反应1小时蛋白酶纯度>95%,asdeterminedbySDS-PAGE通善SUMOProtease活性测试待测融合蛋白100µg,加入sumoprotease2µl,4℃反应16小时,取酶切前后样品SDS-PAGE检测,如右图所示>90%融合蛋白被切割。储存条件长期储存于-80℃,可保存2年;或小量分装后保存于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。10XSUMOBuffer置于-20℃保存。包装规格货号规格RPP003-500500URPP003-20002000URPP003-1000010000U
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