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时间:2018-07-28
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1、***人民医院 临检室作业指导书文件编号:TZYY-3-SH-Yq-01版本/修订号:A/1项目:BC-5380血液细胞分析仪发布部门:检验科发布日期:2018年01月10日页码:第17页共99页生效日期:2018年03月10日1预期用途适用于血液白细胞计数及分类,红细胞计数,血红蛋白,血小板计数,红细胞压积,红细胞体积分布宽度,平均红细胞血红蛋白含量,平均红细胞血红蛋白浓度,平均红细胞体积,血小板体积分布宽度、平均血小板体积和血小板压积等检验。2测试原理2.1白细胞测量n激光流式
2、细胞技术当一定量的血细胞被吸入并经过特定量的试剂作用后,血样经喷嘴注入充满稀释液的圆锥形流动室中。在稀释液形成的鞘液包裹下,细胞单个排列成行地穿过流动室的中央。当悬浮在鞘液中的血细胞经过二次加速后通过激光检测区时,血细胞受到激光束的照射,产生的散射光性质与细胞大小、细胞膜和细胞内部结构的折射率有关。低角前向散射光反映了细胞的大小,高角前向散射光则反映细胞的内部精细结构和颗粒物质。光电二极管接收这些散射光信号并将其转化为电脉冲,根据采集到的这些电脉冲数据,可以得到血细胞大小及细胞内部信息的二维分布图,称为
3、散点图,横坐标反映细胞的内部复杂度信息,纵坐标反映细胞的体积。从DIFF通道散点图可得到淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞各自占白细胞总数的百分比。n阻抗法本分析仪利用库尔特原理对白细胞/嗜碱性粒细胞进行计数。检测样本经过二次稀释后进入WBC检测单元。检测单元有一个小的开口,叫做检测小孔。小孔两侧有一对正负电极,连接恒流电源。由于细胞具有不良导体的特性,稀释样本中的细胞在恒定负压的作用下通过检测小孔的时候,电极间的直流电阻就会发生变化,从而在电极两端形成一个同细胞体积大小成比例的脉冲信号。当细
4、胞连续地通过小孔,就在电极两端产生一连串的电脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞数相当,脉冲的幅度与细胞的体积成正比。将采集到的电脉冲放大后与正常的白细胞/嗜碱性粒细胞体积范围所对应的通道电压阈值相比较,计算出电脉冲幅度落在白细胞/嗜碱性粒细胞通道内的电脉冲个数。由此,所有采集到的电脉冲根据不同的通道电压阈值进行了分类,落在白细胞/嗜碱性粒细胞通道内的电脉冲个数就是白细胞/嗜碱性粒细胞的个数。依据脉冲电压幅度划分的每一个通道范围内的细胞个数决定了细胞的体积分布。用横坐标表示细胞体积,纵坐标表示细胞相对数量的
5、二维图就是反映细胞群体分布情况的直方图。2.2血红蛋白浓度测量n比色法在比色池中,被稀释的样本加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,后者与溶血剂结合后形成血红蛋白复合物,在比色池的一端让LED光管发出中心波长为525nm的单色光照射血红蛋白复合物溶液,在另一端通过光电管接收透射光,并将光强信号放大后转换为电压信号,通过与比色池中加入样本之前(比色池中只有稀释液)测得的本底透射光强产生的电压比较,得到样本的血红蛋白浓度。注:该SOP变动程序如果本操作程序使用者在实际工作中发现其存在问题,则应向科室负责
6、人提出,科室负责人则召集所有与本程序有关的人员讨论,以决定是否需要变更本程序。***人民医院 临检室作业指导书文件编号:TZYY-3-SH-Yq-01版本/修订号:A/1项目:BC-5380血液细胞分析仪发布部门:检验科发布日期:2018年01月10日页码:第17页共99页生效日期:2018年03月10日2.3红细胞/血小板测量n阻抗法原理本分析仪利用阻抗法原理对在RBC检测单元对红细胞/血小板进行计数。检测单元有一个小的开口,叫做检测小孔。小孔两侧有一对正负电极,连接恒流电源。由
7、于细胞具有不良导体的特性,稀释样本中的细胞在恒定负压的作用下通过检测小孔的时候,电极间的直流电阻就会发生变化,从而在电极两端形成一个同细胞体积大小成比例的脉冲信号。当细胞连续地通过小孔,就在电极两端产生一连串的电脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞数相当,脉冲的幅度与细胞的体积成正比。将采集到的电脉冲放大后与正常的红细胞/血小板体积范围所对应的通道电压阈值相比较,计算出电脉冲幅度落在红细胞/血小板通道内的电脉冲个数。由此,所有采集到的电脉冲根据不同的通道电压阈值进行了分类,落在红细胞/血小板通道内的电脉冲个
8、数就是红细胞/血小板的个数。依据脉冲电压幅度划分的每一个通道范围内的细胞个数决定了细胞的体积分布。用横坐标表示细胞体积,纵坐标表示细胞相对数量的二维图就是反映细胞群体分布情况的直方图。3一般资料设备名称全自动血液细胞分析仪设备英文名称AUTOHEMATOLOGYANALZER型号BC-5390仪器编号技术规格仪器体积59×57×52.5cm测试速度全血:不低于60样本/小时;预稀释:不低于60样本/小时光源半导体激光检测系统流式细胞检测器主
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