地高辛digoxin酶联免疫分析elisa

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1、地高辛(Digoxin)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1使用目的：本试剂盒用于血液、血清、尿液等样本中地高辛(Digoxin)残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有地高辛(Digoxin)偶联抗原，加入地高辛(Digoxin)标准品或样品，游离地高辛(Digoxin)与微孔条上预包被的地高辛(Digoxin)偶联抗原互相竞争地高辛(Digoxin)抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中地高辛(Digoxin)含量成反比，通过

2、标准曲线计算样品中地高辛(Digoxin)的含量。3试剂盒组成3.1预包被的地高辛(Digoxin)偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2地高辛(Digoxin)标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L3.3抗地高辛(Digoxin)抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，2

3、0ml），用于洗板。3.9说明书一份。44需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。6.3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃4），建议至少回温2小时。6.4标准品中含有地高辛(Digoxin)，使用时应特别注

4、意，操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果6.9混合试剂时应避免起泡。7工作液准备7.1地高辛(Digoxin)标准品溶液：0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L7.2浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用7.3样本稀释液：备用7.3显色剂：已备用，

5、避免光线直照7.4反应终止液：已备用8样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）8.1取10g粉碎的样品，加20ml70%甲醇溶液8.2强力振荡3分钟8.3用WhatmanNo1滤纸过滤8.4取100µl处理后的样品，加入400µl样本稀释液8.5取50μl稀释液进行分析（稀释倍数10）动物组织前处理8.6准确称取1±0.05g匀浆后的组织样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min8.7取

6、上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干8.8加入2mL1×样品稀释液Ⅰ,750rpm涡旋20s8.9取100ml用于分析饲料前处理方法8.10准确称取1±0.05g粉碎饲料样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干8.12加入1mL1×样品稀释液Ⅰ,涡旋20s，取出100ml加到900ml1×样品稀释液Ⅰ，混匀后取100ml用于分析牛奶前处理方法8.13取1ml牛奶样品到2ml离心管中；用1×样品稀释液Ⅱ稀释30倍，混匀后取100ml用于分

7、析奶粉前处理方法8.14准确称取0.3g奶粉样品到7ml的聚苯乙烯离心管中；加入2ml1×样品稀释液Ⅲ，2ml正己烷，震荡混匀8.154000r/min以上离心5min，去除有机层和中间层，取下层溶液100ml到300ml1×样品稀释液Ⅲ8.16混匀后取100ml用于分析9酶免分析步骤9.1实验须知9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃4），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的精确度和准确度。9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1