酸枣仁及其混淆品理枣仁鉴别

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1、酸枣仁及其混淆品理枣仁鉴别酸枣仁为鼠李科植物酸枣(ZiziphusJujubaMill,Var,spinosa(Bunge)HuexH．F．chou)的干燥成熟种子，具有补肝、宁心、敛汗、生津功效，用于虚烦不眠，惊悸多梦，体虚多汗，津伤口渴等症。药理研究表明：本品具有镇静催眠，镇痛抗惊厥、降血脂及抗血小板聚集、增强免疫功能、降压、抗缺氧及抗心肌缺血、抗心律失常、抗衰老、抗辐射，降温和兴奋子宫等作用。由于主流商品酸枣仁野生资源减少，市场货源供不应求，而市场上常用一种外形与正品酸枣仁相似的滇刺枣(ZiziphusmauritianaLam）

2、的干燥种子（理枣仁）来混淆出售，且数量极多。本文从二者的性状，显微、理化，蛋白质高效毛细管电泳（HPCE）来对比鉴别，以供参考。�1性状特征�1．1酸枣仁呈扁圆形或扁椭圆形，长0．5~0．9cm，宽0．5~0．7cm，中央最厚处约0．3cm，表面紫红色或紫褐色，平滑有光泽，偶见裂纹，一面较平坦，中间有一条隆起的纵线纹，另一面稍凸起。一端有白色的种脐，为线形小凹陷，另一端有点状凸起的合点。质坚硬，破开后可见白色胚乳及黄白色子叶2片，富油性，气微、味淡。�1．2理枣仁呈扁圆形或椭圆形，长0．4~1．05cm，宽0．5~0．8cm，厚0．1~

3、0．3cm。表面红棕色或黄棕色，有光泽。有的具淡黄棕色斑点花纹，一面平坦，中央无纵线纹，另一面隆起。种皮脆，内含黄白色种仁，富油性，气微，味微酸。�2显微鉴别�2．1酸枣仁粉末棕红色，种皮栅状细胞棕红色或黄棕色，靠外侧有一条明显的光辉带，棕色薄壁细胞含淡棕色或黄棕色物。�2．2理枣仁粉末黄棕色，种皮栅状细胞黄棕色或红棕色，靠外侧光辉带不明显，棕色细胞内含草酸钙方晶。�3理化鉴别�3．1颜色反应�3．1．1酸枣仁取粗粉2g，加20ml乙醇回流提取1h，滤过，取滤液4ml置蒸发皿中，蒸去溶剂，加少量醋酐溶解残渣，移至干燥试管中，再沿管壁滴加

4、浓H�2SO�40．4ml，两相界面呈红棕色环，上层由无色渐变浅黄绿色，最后呈浅棕色。�3．1．2理枣仁取粗粉2g，加20ml乙醇回流提取1h，滤过，取滤过液4ml置蒸发皿中，蒸去溶剂，加少量醋酐溶解残渣，移至干燥试管中，再沿管壁滴加浓H�2SO�40．4ml，液层界面呈现红棕色环，上层液呈棕色渐变紫红色，最后呈黑绿色。� 53．2薄层色谱鉴别�3．2．1试剂与试药正丁醇、乙醚、甲醇、磷钼酸均为分析纯，硅胶G板（青岛海洋化工厂），110℃活化30min。�3．2．2薄层层析各取正品酸枣仁和混淆品理枣仁粉末5g分别置索氏提取器中，用乙醚回

5、流脱脂，药渣提去残醚，用甲醇回流提取2h，提取液回收甲醇至干，残渣加水4ml，混匀，水溶液用5倍量的正丁醇分2次提取，合并正丁醇提取液，减压回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml溶解，取上述两种溶液各10ml，分别点于同一硅胶G板上，以水饱和的正丁醇为展开剂，展距12cm，取出，80℃烘干，喷10%磷钼酸乙醇液，于100℃烘约5min。结果：酸枣仁、理枣仁除有2个蓝色斑点一致外，理枣仁还多出2个蓝色斑点。�4蛋白质高效毛细管电泳法[2]�4．1材料�4．1．1仪器与试剂美国BIO-RAD公司BiofocusTM3000型CapillaryIo

6、nAnalyzer配有紫外扫描检测器，熔融石英毛细管75um×60cm（河北永年光纤厂），所用试剂均为分析纯。�4．1．2电泳条件电解缓冲液为30mmol/L硼酸盐溶液（pH8．5）；电压为20KV；温度20℃；紫外检测波长2005nm；重力进样，时间5s；开机后先用0．1mmol/L氢氧化钠冲洗毛细管2min，再用去离子水冲洗5min，然后用缓冲液冲洗至基线平稳后开始进样，每两次进样之间设定缓冲液冲洗2min。�4．1．3样品溶液的配制取酸枣仁、理枣仁生药样品0．5g，加入蛋白提取液4ml，在冰浴中研磨成匀浆状，转移至离心管内，以50

7、00r/min离心20min，取上清液备用。Tris-甘氨酸蛋白提取液；Tris-0．6g，甘氨酸2．88g,加蒸馏水溶解至1000ml。碱性蛋白提取液：Tris-HCL0．1mmol/L,抗坏血酸5．7mmol/L,巯基乙醇10mmoL/L,PH8．0。酸性蛋白质提取液:枸橼酸80mmol/L,Na�2HPO432mmol/L,抗坏血酸5mmol/L，巯基乙醇10mmol/L,pH2．8。�4．2结果�4．2．1在酸性提取液中，2个酸枣仁样品其13．69min峰为强吸收峰，而理枣仁其12．06min峰为强吸收峰。�4．2．2在中性提取

8、液中，2个酸枣仁样品其15．59min峰为强吸收峰，而理枣仁12．83min峰为强吸收峰。�4．2．3在碱性提取液中，2个酸枣仁样品其16．53min峰为强吸收峰，而理仁枣无明显强吸收峰。�综合3种提取液所