荔枝核黄酮类化合物对hepg2.2.15细胞系hbsag与hbeag表达及hbv论文

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1、荔枝核黄酮类化合物对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达及HBV论文徐庆，宋芸娟，陈全斌，义祥辉【关键词】,荔枝核【Abstract】AIM:TostudytheantiHBVactionofflavonoids(IL)extractedfromthecoreofLitchiChinensisSonn．METHODS:Opticaldensitymensuration,cellcultureandFQPCRtechniquethecoreofLitchiChinensisSonnontheexpressionsofHBsAg

2、andHBeAgandthecontentofHBVDNAinHepG2.2.15cells．RESULTS:In96holeplatetest,IL（800，400，200，100mg/L）hadobviousinhibitoryeffectsontheexpressionsofHBsAgandHBeAginHepG2.2.15cellsonthethirdandsixthexperimentdays,paredg/L）hadobviousinhibitoryeffectsontheexpressionofHBsAgonthethird,

3、sixthandninthexperimentdaysandontheexpressionofHBeAgonsixthandninthexperimentdaysparedg/L)turnedHBVDNAinHepG2.2.15cellsmediumnegative.CONCLUSION:ILhasstrongantiHBVactioninvitro.【Keyenlitchi;flavonoids;HepG2.2.15Cells;hepatitisBsurfaceantigens;hepatitisBeantigens;hepatitisB

4、virus;DNA【摘要】目的：研究荔枝核提取物黄酮类化合物(IL)对乙肝病毒的抑制作用.方法：应用光密度测定法和细胞培养及定量PCR技术研究荔枝核提取物IL对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达及HBVDNA含量的影响.结果：96孔板试验：实验第3,6日，IL对HBsAg和HBeAg表达均有明显的抑制作用（与对照组比较P0.01）.24孔板试验：实验第3,6,9日IL对HBsAg表达有明显的抑制作用（与对照组比较P0.01）；实验第6,9日IL对HBeAg表达有明显的抑制作用（与对照组比较P0.01）；同时采用定量PCR方

5、法检测，IL（400mg/L）可使培养基中的HBVDNA转阴.结论：IL体外实验（培养细胞）有较强的抗乙肝病毒作用.【关键词】荔枝核；黄酮类；HepG2.2.15细胞；肝炎表面抗原，乙型；肝炎e抗原，乙型；肝炎病毒，乙型；DNA0引言荔枝核是无患子科植物荔枝（LitchichinensisSonn）的成熟种子,又名荔仁或荔核，味甘、微苦，归肝、肾经.功效行气散结、祛寒止痛.荔枝核的化学成份除含有皂苷、蒜质外，还含有脂肪酸、聚合花色素成份、氨基酸、挥发性成份、还原糖、淀粉及总糖、蛋白质，以及钙、磷、钠、钾、锌、铜、锰、铁、镉等元素［1］.屠鹏

6、飞等［2］从700mL/L乙醇荔枝核提取物中首次分离、鉴定了13个化合物.有文献报道荔枝核有降血糖、调血脂和抗氧化、保肝作用，水提取物体外实验对乙肝病毒HBsAg、HBVDNA有明显的抑制作用［3］.我们应用HepG2.2.15细胞系培养系统研究发现，荔枝核提取物对乙肝病毒HBsAg、HBeAg有明显的抑制作用［4］.肖柳英等［5］报道荔枝核对小鼠免疫性肝炎有明显的保护作用.但有效组份尚不清楚，为了进一步探讨荔枝核对乙型肝炎病毒的抑制作用及其有效组份，我们研究了荔枝核提取物IL对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达及HBVD

7、NA含量的影响.1材料和方法1.1材料①主要试剂和仪器：DMEM,G418（Gibco分装），谷氨酰胺、胎牛血清（Sigma），HBsAg,.freelL/LDMSO溶解，配成160mg/L浓度，以50g/LNaHCO3或1mol/LHCl调pH至6.8~7.2,0.22μm针头过滤器过滤后备用.1.2.2HepG2.2.15细胞系的培养体系DMEM中加入380mg/LG418,150mL/L胎牛血清，2mmol/L谷氨酰胺，10mL/L青、链霉素，用50g/LNaHCO3调pH7.2~7.4培养，每10d传代一次.1.2.3药物对细胞的毒

8、性作用试验1.2.3.1用SRB显色法［6］测定药物对细胞的毒性具体方法：将HepG2.2.15细胞按1×108/L接种于96孔细胞培养板，每孔190μL，依次将IL,LA各组份