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《survivin反义寡核苷酸诱导白血病细胞k562凋亡的作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、survivin反义寡核苷酸诱导白血病细胞K562凋亡的作用实用诊断与治疗杂志001生篁鲞蔓塑●?15?论着survivin反义寡核苷酸诱导白血病细胞K562凋亡的作用阳洁,姜浩,陈艳华(摘要]目的:观察survivin反义寡核苷酸对K562细胞凋亡的作用.方法:以脂质体转染survivin反义寡核苷酸;MTT检测survivin反义寡核苷酸对K562细胞的生长抑制;流式细胞术,荧光分光光度计分别检测细胞凋亡和半胱氨蛋白水解酶3的活性;荧光分光显微镜观察凋亡形态.结果:survivin反义寡核苷酸对K562细胞的生长抑制呈
2、浓度一时闻依赖性;400nmol/L的AS0DN作用48h后,与对照组相比,K562细胞的凋亡率增加(18.60士3.46)%VS(1.35士0.31),半胱氨蛋白水解酶3的活性增加77.99%.细胞表现为细胞皱缩,核质浓缩,核碎裂,细胞起泡以及凋亡小体形成等凋亡特征的形态学改变.结论:survivin反义寡核苷酸能抑制K562细胞的生长,诱导凋亡.(关键词]survivin;反义寡核苷酸;K562;凋亡中图分类号:R392.3文献标识码:A文章编号:1672—3457(2007)01—015-03Effectofanti
3、senseoligodeoxynucleotidetargetingsurvivinontheapoptosisofleukemiccellK562YANGJie,JIANGHao,CHENYanhua.DepartmentofHematology,theFirstAffiliatedHospitalofNanhuaUniversity,Hengyang421001,China[Abstract]ObjectiveToobservetheeffectofinductionofapoptosisbysurvivinantis
4、enseoligodeoxynucleotideinleukemiccellK562.MethodsSurvivinantisenseoligodeoxynucleotidewastransfectedtoK562cellswithliposome.CytotoxicityofantisenseohgodeoxynucleotidewasdetectedwitheolorimetrieMTT.ApoptosisandCaspase一3activityweredetectedwithflowcytometerandfluor
5、ometer.Apoptoticmorphologywasobservedunderfluorscentmicroscope.ResultsSurvivinantisenseongodeoxynucleotideinhibitedthecells'proliferationinadoseandtimedependentmanner.Comparedwithcontrol,apoptoticrateincreased,(18.60±3.46)VS(1.35±0.31)andCaspase一3activityincreased
6、by77.99aftertreatmentwith400nmol/Lantisenseoligodeoxynucleotidefor48hours.Apoptosiswithnuclearchromatincondensationandfragmentationaswellascellshrinkageandtheformationofapoptoticbodieswereobserved.ConclusionSurvivinantisenseongodeoxynucleotideisabletoinhibitK562ce
7、lls'proliferationandinduceapoptosis.(Keywords3survivin;antisenseoligodeoxynucleotide;K562;apoptosis—survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白因子家族的一个新成员,它与其他的凋亡抑制蛋白不同之处在于具有明显的组织表达特异性,广泛表达于人的胚胎组织和多种肿瘤组织[1],可抑制细胞凋亡,对肿瘤的发生,发展和肿瘤细胞的耐药起到相当重要的作用.利用survivin反义寡核苷酸的拮抗作用来促进肿瘤细胞的凋亡和抑制肿瘤细胞增殖的研究已成
8、为众人关注的课题.本实验以阳离子脂质体为载体将人工合成的survivin反义寡核苷酸导人白血病细胞K562内,观察了其对白血病细胞凋亡的影响,为白血病的治疗寻找作者单位:南华大学第一附属医院,湖南省衡阳市421001作者简介;阳洁(1972年一),女,主治医师,硕士.研究方向:白血病的治疗.通讯作者:姜