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1、骨形成蛋白在胫骨截骨快速延长成骨过程中的表达及意义范国华,林月秋,李主一,周仲英【关键词】骨形态发生蛋白质类Expressionofbonemorphogeicproteinanditssignificanceduringdistractionosteogenesisfolloy 【Abstract】AIM:Tostudytheexpressionofbonemorphogeicprotein(BMP)anditssignificanceduringdistractionosteogenesis.METHODS:Rab
2、bitsakethemodelsoftibiallengtheningbyosteotomyanddistractionandsacrificedat5,10,15,20,30and40daftertheinterventions.BMPatthemarginsofboneformationindifferenttimeperiodsoftibiallengtheningmunohistochemicallyusingmonoclonalantibodyagainstBMP.RESULTS:Thereeperiods.The
3、expressionofBMPcanbefoundinmostofthecellsandtissuesexceptinflammatorycells,osteoidandtrabecularbone.Thereesenchymalcells,chondrocytes,osteoblasts,osteocytesandmarroportantroleinthecourseofdistractionosteogenesis.ThedeficiencyofBMPmaybeamainreasonforbonenonunionindi
4、stractionosteogenesis. 【Keyorphogeicproteins;osteogenesis,distraction;boneregeneration;bonenonunion 【摘要】目的:探讨快速延长成骨过程中骨形成蛋白(BMP)的表达及意义.方法:制作兔胫骨截骨快速延长动物模型,分别于延长第5,10,15,20,30和40日在延长区取材,以抗骨形成蛋白单克隆抗体(BMPMcAb)行SP法免疫组化染色光镜观察.结果:在骨延长的整个过程中均有BMP的表达,不同时相BMP表达的部位不同.除炎症细胞、
5、类骨样组织及骨小梁外,几乎所有细胞及组织均有BMP存在.间充质细胞、软骨细胞、成骨细胞、骨细胞、骨髓细胞BMP呈高表达.结论:BMP在骨延长成骨过程中发挥着重要作用.BMP表达量不足可能是导致快速骨延长骨不连接的重要因素. 【关键词】骨形态发生蛋白质类;骨生成,内脱位;骨再生;骨不连接 0引言 自1905年Codivilla首次报道应用截骨术后分次牵开的方法施行股骨持续延长术以来,骨延长技术在临床得到了广泛应用.尤其是苏联学者Ilizarov研究发现了组织牵张再生规律、提出了骨骼延长技术的生物学和力学原则以后,骨延长已
6、经成为现代矫形外科治疗各种骨折不连接、骨缺损等的重要手段〔1-2〕.然而延长术自身存在的各种并发症严重影响其临床应用及治疗效果〔2-3〕.现有研究已经证实〔3-6〕,骨折愈合过程中有多种骨生长因子参与,其中骨形成蛋白(bonemorphogeicprotein,BMP)是近年来最为引人注目的一组新型骨生长因子,在骨折愈合过程中发挥着重要作用,且应用外源性BMP可大大缩短骨折愈合所需时间并提高新生骨的质量.骨延长是一种特殊形式的骨折,BMP在骨延长过程中的表达、作用及潜在应用前景已成为目前研究热点〔2-3,10〕.我们应用抗骨
7、形成蛋白单克隆抗体(BMPMcAb)研究了兔胫骨截骨快速延长成骨过程中BMP的表达,并就BMP在骨延长区骨愈合过程中的作用作了初步探讨. 1材料和方法 1.1材料选用3mo龄清洁级健康日本大耳白兔18只,均为雌性,体质量2.0~2.3(平均2.1)kg.每只兔右后肢为手术延长侧,左后肢为自身正常对照.制作右胫骨干中下1/3处截骨延长模型.术后第4日开始延长,延长速度2.0mm/d,分两次完成,共延长10d.SP免疫组化试剂盒(北京中山生物技术公司).抗骨形成蛋白单克隆抗体(BMPMcAb1∶50第四军医大学口腔医学院病理
8、学教研室). 1.2方法分别于延长第5,10,15,20,30和40日随机抽取3只动物,空气栓塞致死后完整切取两截骨端间骨延长区新生骨组织,固定于10g/L福尔马林溶液、4℃保存24~48h,4℃低温下以5g/L硝酸脱钙,流水冲洗、修块,常规脱水、浸蜡、包埋并切片,以抗骨形成蛋白单克隆抗