鼻息肉上皮细胞增殖活性和凋亡活性的比较

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1、鼻息肉上皮细胞增殖活性和凋亡活性的比较【关键词】鼻息肉上皮细胞增殖凋亡Abstract:ObjectiveToinvestigatethestatusofthebalancebetinedfor29casesofnasalpolypsinthetreatmentgroupand11casesofnormalinferiorturbinatesinthecontrolgroupbyimmunohistochemicalstaining.TheapoptosiscellsinsiteinedbytheTUNELtechnique.Results①BoththePA

2、positiveindex（PIPA）andtheapoptosisindex（AI）ofepithelialcellsinnasalpolypsinentlyhigherthanthoseinnormalinferiorturbinates（30.02±5.89,5.33±2.79,respectively）(P＜0.01).Hoalinferiorturbinates（6.93±3.32）(P＜0.01).②ThePIPAofepithelialcellsinnasalpolyps(53.60±11.10)inentlyhigherthantheAIofe

3、pithelialcellsinnasalpolyps（29.48±8.20）(P＜0.01).ConclusionsBothproliferationactabilityandapoptosisactabilityofepithelialcellsinnasalpolypsareincreasing,andthelatterisofalargeincreasingrange,buttheproliferationrateofepithelialcellsinnasalpolyps,takingoneulationacpaniedbyoverprolifer

4、ationofepithelialcellsinnasalpolyps.Key连续厚切片，贴于涂有明胶的载玻片上，58?℃烤干1?h，置4?℃冰箱中备用。1.3实验试剂即用型免疫组化二步法ElivisionTM染色试剂盒［ElivisionTMticals公司。PA一抗见表1。编号克隆号同型物稀释度供应商PA鼠抗人单克隆抗体MAB0145PC10IgG2a/k即用型MaximBiotech1.4免疫组化（ElivisionTM二步法）按ElivisionTM二步法试剂盒说明行免疫组化染色，观察PA蛋白的表达。PA一抗采用鼠抗人单克隆抗体。显色剂采用DAB溶液

5、。PBS代替一抗，其他操作步骤相同，作为阴性对照。结果判断：PA阳性细胞细胞核呈棕黄色或棕褐色。随机选取5个含上皮细胞的高倍视野（×400），计数上皮细胞数和PA阳性上皮细胞数，计算阳性指数（PI=阳性上皮细胞总数/上皮细胞总数）。1.5TUNEL过氧化酶原位标记法按TUNEL过氧化酶原位标记试剂盒说明行原位杂交，观察细胞凋亡。蛋白酶K工作液、TUNEL反应液（酶溶液+标记溶液）和DAB显色液均新鲜配制；荧光标记的POD转化液为即用型。标记溶液代替TUNEL反应液,其他操作步骤相同，作为阴性对照。结果判断：凋亡细胞细胞核呈棕黄色或棕褐色。随机选取5个含上皮细胞

6、的高倍视野（×400），计数上皮细胞数和凋亡上皮细胞数，计算凋亡细胞指数（AI=凋亡上皮细胞总数/上皮细胞总数）。1.6统计学处理采用SPSS10.0fors统计软件包对实验数据进行贮存和处理。采用两独立标本t检验比较实验组和对照组PIPA和AI的统计学差异。采用单标本t检验比较实验组PIPA和AI的统计学差异。P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1上皮细胞PA基因蛋白的表达11例正常鼻黏膜上皮PA阳性细胞仅分布于基底层，未见于表皮层。29例鼻息肉上皮PA阳性细胞大多数分布于基底层呈棕褐色，少数分布于表皮层呈棕黄色，从内向外递减（彩图11）；1例鼻息肉上

7、皮下微腺体形成，微腺体PA阳性细胞多见，与上皮PA阳性细胞呈连续渐变的显微解剖学关系（彩图12）；1例鼻息肉上皮呈局部内翻性乳头状瘤样改变（彩图13）。2.2上皮细胞TUNEL原位细胞凋亡检测结果11例正常鼻黏膜上皮凋亡细胞仅见于基底层，未见于表皮层；29例鼻息肉上皮凋亡细胞大多数分布于基底层，少数分布于表皮层（彩图14）。2.3上皮细胞PIPA和AI（±s）的比较见表2。3讨论所有多细胞有机体都存在细胞增殖和细胞凋亡的动态平衡，构成控制细胞群体大小的“阴阳”调节环，对多细胞有机体稳态的维持、正常生理功能的发挥和疾病的转归有十分重要的意义［5］。如果细胞增殖过

8、多或凋亡减少，就会导致细胞过剩性疾病，