T∕CI 003-2022 低植酸小麦籽粒中植酸含量指标和测定方法

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ICS67.060CCSB21!"#$!"#$%%&'(%(()*+,-./0*+123456789Indexanddeterminationmethodofphyticacidcontentinlowphyticacidwheatvariety全国团体标准信息平台(%((:(:;<=(%((:(:;>?0@@ABCDEF<=

1!"#$%%&'(%((GH⾔..............................................................................................................................................2引⾔..................................................................................................................................................3低植酸⼩籽粒中植酸含量指标和测定⽅法..................................................................................41围...................................................................................................................................................42规性引⽤⽂件...............................................................................................................................43术语及定义.......................................................................................................................................44检测⽅法............................................................................................................................................44.1原理.................................................................................................................................................44.2试剂................................................................................................................................................4除另有规定外，⽔符合GB/T6682中规定的⼀级⽔。..............................................................44.2.1试剂.............................................................................................................................................44.2.2溶配制.....................................................................................................................................54.2.3植酸钠及溶配制.....................................................................................................................54.3器和设备....................................................................................................................................54.4试样制备与存.............................................................................................................................54.5分析步骤.........................................................................................................................................54.6结果分析........................................................................................................................................6全国团体标准信息平台1

2!"#$%%&'(%((IJ本⽂件按照GB/T1.1—2020《标准化⼯作导则第1部分：标准化⽂件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本⽂件的某些内容可能涉及专利，本⽂件的发布机构不承担识别专利的责任。本⽂件由中国国际科技促进会标准化⼯作委员会提出。本⽂件由中国国际科技促进会归⼝。本⽂件起草单位：⼭东天泽泰⽥种业科技有限公司，⼭东华⽥农业科技有限公司，⼭东国仓健⽣物科技有限公司，⼭东农业⼤学，解放军总医院普通外科学部,，济源市农业科学院，莱州宏源⾯粉有限公司，泰安市⾕⾹园⻝品有限公司。本⽂件主要起草⼈：⽥纪春、于海霞、邓志英、胥倩、彭莉、⽥磊、张丙乾，彭涛，王群⻘、刘振、王⻄振、赵善仓、王延训、杨明、吕⺠全、谢秀伦、由佳辉。本⽂件为⾸次发布，今后将根据低植酸⼩⻨的社会需求及植酸检测技术发展情况适时修订。全国团体标准信息平台2

3!"#$%%&'(%((KJ⼩是我国⼈⺠的主要⻝物，⻝物中的铁、锌、硒等微量营养元素对⼈体健康⼗分重要。⼤多数⾕物中植酸含量很⾼，其合作⽤将⽆机盐和蛋⽩质变成不能吸收的磷酸盐合物，严重影响了铁、锌等微量营养元素有性利⽤，因此被认为是单胃动物的抗营养因⼦。特别是占⼩25%左右的麸(含糊层)，含有较⾼蛋⽩质、脂肪及膳⻝纤维等营养物质，因为植酸含量很⾼，限制了全的有利⽤，也不能单独直接作动物饲料使⽤。因此，培育低植酸⼩品种⼗分重要。调研发现，国内外⾄今没有关于低植酸⼩的定义和植酸含量指标，检测⽅法也⽆统⼀标准。本标准的制定，次提出了低植酸⼩品种的植酸含量指标和简便准确的测定⽅法，对培育更好的低植酸⼩新品种，满⾜⼈⺠群众对⽣活质量和健康⽔平的新需求，确我国营养导向型农业的健康发展有重⼤意义。国内外多个研究团对开展了植酸含量鉴定和低植酸⼩新品种培育相关研究。⼭农业⼤学⼩品质育种团队关于植酸研究，开始于2007届博⼠吴澎的毕业论⽂，以后⼜有⼏名博⼠和硕⼠进⾏了⾼、低植酸种质的筛选鉴定，并通过有性杂和诱变育种，进⾏了⾼、低植酸新品种的选育，⼏个低植酸品系已经出圃。在多年研究基础上，对低植酸⼩和⼩籽粒中植酸含量指标进⾏确定，对植酸的测定⽅法进⾏统⼀规，将有利于低植酸⼩新品种开发和营养健康农业的发展。全国团体标准信息平台3

4!"#$%%&'(%(()*+,-./0*+1234567891LM本⽂件规定了植酸和低植酸⼩的术语、定义、围、植酸含量指标以及检测⽅法。本⽂件适⽤于⼩种⼦及制品中植酸含量的定量测定，企业在制定企业标准时可参照使⽤，相关机构在选育、审定和⽤低植酸⼩及其制品时可参照使⽤。2LOKPR下列⽂件中的内容通过⽂中的规性引⽤⽽构成本⽂件必不可少的款。其中，注⽇期的引⽤⽂件，⽇期对的版本适⽤于本⽂件；凡是不注⽇期的引⽤⽂件，其最新版本（包括所有的修改单）适⽤于本⽂件。GB/T6682分析实验室⽤⽔规格和试验⽅法GB/T1351⼩GB/T1355⼩GB/T5009.153⻝品安全国家标准⻝品中植酸的测定3STU7V3.1*+环⼰六醇六磷酸（C6H18O24P6）⼜称肌醇六磷酸，是⼀种⼴泛存在于植物中的有机磷类合物，与钙、铁、镁、锌等⾦属离⼦产⽣不溶性合物。3.2)*+,在⽣⻓发育过程中，籽粒中⾃然产⽣和积累的植酸含量低于5g/kg的⼩品种（系）。4W689.4.1XY试样全国团体标准信息平台⽤酸性溶提取，经净后的植酸与三氯铁-磺基⽔杨酸混合发⽣褪⾊反，⽤分光光计在波⻓500nm处测定吸光，计试样中植酸含量。4.2Z剂除另有规定外，⽔应符合GB/T6682中规定的⼀级⽔。4.2.1Z剂4

5!"#$%%&'(%((4.2.1.1氧钠（NaOH）。4.2.1.2三氯铁（FeCl3）。4.2.1.3三氯⼄酸（C2HCl3）。4.2.1.4盐酸（HCl）。4.2.1.5磺基⽔杨酸（C7H6O6S·2H2O）。4.2.2溶配[4.2.2.10.7mol/L氧钠溶：称取氧钠28g，⽤⽔溶解定容⾄1000mL。4.2.2.215%三氯⼄酸溶：称取三氯⼄酸15g，⽤⽔溶解定容⾄100mL。4.2.2.31.2%盐酸溶：量取36.5%浓盐酸33.3mL，少量多次加⼊966.7mL⽔中，⽤玻璃棒慢慢动溶解。4.2.2.4酸钠-盐酸提取溶：称取100g⽆⽔酸钠溶于1.2%盐酸溶，⽤1.2%盐酸溶定容⾄1000mL。4.2.2.5三氯铁-磺酸⽔杨酸反溶：称取1.5g三氯铁和15g磺酸⽔杨酸，加⽔溶解并定容⾄500mL。使⽤⽤⽔稀释15倍。4.2.3*+钠U溶配[4.2.3.1植酸钠（CAS号：14306-25-3），纯≥90%。4.2.3.2植酸钠溶：准确称取1.56g（精确⾄0.01g）纯≥90%的植酸钠，⽤⽔溶解定容⾄100mL，配得浓为10.0mg/ml植酸钠溶。使⽤⽤⽔稀释⾄0.1mg/ml。4.3\]5^4.3.1天平：感量0.01g。4.3.2振荡器。4.3.3离⼼机：5000r/min。4.3.4分光光计（岛津紫外可⻅分光光计UV2700）。4.4Z`[abc⼩籽粒（GB1351）⽤⻛（波通3100）制成⼩，过1.0mm筛，密封并标明标记。将试全国团体标准信息平台样置于-80℃冰箱存。4.5defg4.5.1提取称取试样10.0g，置于具塞三⻆瓶中，加⼊10mL酸钠-盐酸提取溶（4.2.2.4），震荡5

6!"#$%%&'(%((提取2h，提取于4000r/min离⼼30min，收集全部上清并⽤酸钠-盐酸提取溶定容⾄50mL，经快速滤纸过滤后4℃冰箱存备⽤。4.5.2净取上清2.0ml，加⼊15%三氯⼄酸2.0mL于10ml硬质玻璃试管中，混匀，4℃冰箱中静置2h，离⼼，取全部上清于25ml容量瓶中，⽤0.7mol/LNaOH调节pH值为6.0-6.5，加⽔定容⾄，混匀。4.5.3de674.5.3.14准曲线的[作准确吸取植酸钠溶（4.2.3.2）0mL、0.04mL、0.1mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL于6⽀10ml⿐塞管中，分别⽤⽔稀释⾄5mL，制得了5mL溶中含植酸0.0mg、0.004mg、0.01mg、0.1mg、0.2mg、0.5mg的系列溶，加⼊4mL反溶（4.2.2.5），混匀，静置20min以后吸取部分清倒⼊1cm⽐⾊⽫中，于500nm处测定吸光，证吸光在0.2-0.8围内。以吸光为纵坐标，植酸的质量为横坐标，绘制标准曲线或计回归⽅程（GB5009.153）。4.5.3.267准确吸取5ml所得净（4.5.2）于10mL离⼼管中，加⼊反溶（4.2.2.5）4mL，涡混匀，2500r/min离⼼10min，上清即为测定；不加样品溶，得⽐⾊空⽩溶。将测定和⽐⾊空⽩溶分别倒⼊⽐⾊杯中，⽤空⽩调“零点”，在500nm波⻓下测定吸光。试样8次重复，2次平⾏⽐⾊，并在标准曲线上查得或从回归⽅程计出试中植酸含量。4.6hide4.6.1试样中植酸含量按式（1）计：式中：X：试样中植酸含量（g/kg）;m2：5ml测定⽤的试中植酸的质量（mg）；25：洗脱定容体积（mL）；m1：试样质量（g）；5：测定⽤的试体积（mL）；V：净的提取体全国团体标准信息平台积（mL）；50：提取定容体积（mL）。计结果留三有数字。4.6.2精密在重复性件下获得的两次独⽴测定结果的绝对差值不得超过术平均数的5%。6