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时间:2021-04-16
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1、人教版教学课件基因工程课件(人教版高中生物选修3)设想一能否让水稻植株也能够固定空气中的氮?能否让细菌“吐出”蚕丝?设想二能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物?设想三……▲“基因工程”技术即根据人类的意愿定向改变生物---令人神往!DNA重组技术(基因工程)的基本工具做工程是需要工具的.前面介绍的利用基因工程培育抗虫棉的主要步骤有哪几个?步骤一:从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来抗虫基因(目的基因).步骤二:抗虫基因与运载体DNA连接步骤三:抗虫基因导入受体(普通棉花)细胞▲思考:提示:共四步;步骤四是“检测和鉴定”.▲上述的三个步骤中各需要什么
2、工具?步骤一的工具:步骤二的工具:步骤三的工具:“分子手术刀”——限制性内切酶“分子缝合针”——DNA连接酶“分子运载车”——载体▲这里的“分子”是指__________________分子.DNA(目的基因、载体)▲这三种工具的作用各是什么?1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”限制酶主要是从原核微生物中分离纯化出来的。能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间(此处叫“切点”)的磷酸二酯键断开(注意:不是氢键).(二)DNA重组技术的基本工具及其作用注意:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在一个特定的切
3、点上切割DNA分子。即:特异性.(注意:特异性表现在两个方面.)AATTGCCTTAAGDNA双链及“磷酸二酯键”磷酸二酯键1.大肠杆菌(EcoRΙ)的一种限制酶能识别的脱氧核苷酸序列是(用碱基表示)_____________;切点在________之间。限制酶▲看图回答:GAATTCG和A2.若从切点处切开,形成的两个DNA片断是怎样的?▲限制性内切酶的特异性表现在:特定的核苷酸序列-----是“回文序列”(?).特定的切点.被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端.注意:切口处的两条单链一长
4、一短.伸出来的那一条长链叫黏性末端限制酶▲在G和A之间被限制酶切断的是化学键是___________________.▲“黏性末端”和“平末端”当限制酶在它识别序列的中心轴线的两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端.而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的则是平末端。1.要想获得某一个特定性状的基因(即”目的基因”)必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?要切两个切口,产生四个黏性末端.2.如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,产生黏性末端相同吗?会产生相同的黏性末端..思考:▲你是否想过?限制酶是否会切割自己细胞里的D
5、NA呢?为什么?这对于其自身有意义吗?▲DNA连接酶的种类(根据来源分)及其在功能上的异同.----见课文P5.来源功能同异名称E.ColiDNA连接酶T4DNA连接酶大肠杆菌T4噬菌体形成磷酸二酯键只能:互补的黏性末端黏性末端和平末端均可显然,若将上述两者的黏性末端黏合(连接)起来,就似乎可以合成新的DNA分子(重组DNA分子)了用什么工具连接呢?这个工具是怎样将两者连接起来的?2.DNA连接酶——“分子缝合针”DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口(注意位置)连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了.▲思考:DNA连
6、接酶的作用是使断口处的相邻的两个脱氧核苷酸之间形成____________键.异:DNA连接酶:是将几个DNA片段连接起来;不需DNA模板.DNA聚合酶:则是将脱氧核苷酸连接(聚合)成DNA;需以DNA的一条链为模板.▲提示:注意比较基因工程中的DNA连接酶和DNA复制中的DNA聚合酶的作用有何异同?同:两种酶都是形成磷酸二酯键.----导入过程需要运输“目的基因”的工具——载体。▲如何将目的基因(如上例中的“抗虫基因”)导入受体细胞(即接受目的基因的生物的细胞,如上例中的棉花细胞)?▲注意:一般地,不能将目的基因直接导入受体细胞.▲载体是什么(生物化学
7、成分)?它从哪里获得?它是如何承载目的基因的?3.基因进入受体细胞的载体---“分子运输车”.常用的运载体主要有两类:1)质粒:一些细菌细胞质里的质粒.2)病毒:噬菌体(即细菌病毒)或某些动、植物病毒.▲什么是质粒?是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体(即原核的DNA)之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子.质粒是基因工程最常用的载体.绝大多数细菌质粒都是闭合环状DNA分子。有的一个细菌中有一个,有的一个细菌中有多个.▲小结:质粒是小型、环状的DNA分子.最常用的质粒是大肠杆菌的质粒,其中常含有抗药基因,如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主
8、细胞生存没有决定性作用,但复制只能在宿主细胞内完成。▲质粒的一种:大肠杆菌的质粒
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