霉菌形态及菌落特征的观察山东大学.doc

《霉菌形态及菌落特征的观察山东大学.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、霉菌的培养与形态观察一．实验目的1、掌握霉菌的观察法——小室观察法。2、了解四种常见霉菌形态。二．实验原理1、霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3~10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。2、观察方法观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，

2、本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。3、载玻片培养观察法（小室培养法）用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。三．实验器材2、菌种：曲霉(Aspergillussp.)，青霉，根霉(Rhizopussp.)，毛霉（Mucorsp.），培养7d的马铃薯琼脂平板培养物3、培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）1、仪

3、器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等四．实验内容a)配置150ml的PDA（霉菌）培养基，然后高温灭菌。b)培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一Ｕ形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于110℃灭菌20~30分钟，烘干备用。c)倒平板：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6~7ml注入另两个灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切培养基：在无菌操作的情况下，利用解剖刀将培养基切成d)1cmx1cm的琼脂块，并

4、将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块)。e)在培养基边缘接种：通过无菌操作，用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子，接种于培养小室中琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。f)培养：通过无菌操作，在培养小室中的圆滤纸上加3ml灭菌的20%的甘油（用于保持平皿内的湿度)，盖上皿盖，28℃正置培养一周。g)镜检：取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。五．实验结果1、实验绘图四种霉菌：A曲霉B曲霉局部放大图A青霉B青霉局部放大图毛霉毛霉分析图根霉：根霉整体装片根霉放大图1、实验结果描述菌种曲霉根霉毛霉青霉形

5、态特征具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端膨大成球状顶囊，表面辐射出一层或两层小梗，小梗上着生成串的球形分生孢子。分生孢子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连。菌丝无隔、多核、分枝状，有匍匐菌丝和假根。在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗，其顶端膨大成球形孢子囊。囊的基部有囊托，中间有球形或半球形囊轴。菌丝无隔、多核、分枝状，无假根或匍匐菌丝。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊，无囊托。菌丝有横隔，分生孢子梗亦有横隔，光滑或粗糙。基部无足细胞，顶端不形

6、成膨大的顶囊，其分生孢子梗经过多次分枝，产生几轮对称或不对称的小梗，形如扫帚，称为帚状体。1、实验结果分析及感悟本次试验学会了霉菌的基本培养方法，对霉菌的形态特征也有了一定的了解，并学会了从形态上如何区分四种霉菌的方法。