猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体结合抗原表位的鉴定.pdf

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1、第33卷第9期中国预防兽医学报Vo1．33．NO．92011年9月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineSep．2011doi：10．3969~．issn．1008—0589．2011．09．16猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体结合抗原表位的鉴定李亮，林跃智。，那雷1,2，汤艳东，吕晓玲，周建华，曲娟娟(1．东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨150030；2．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／大动物病研究室，黑龙江哈尔滨150001)摘要：为

2、鉴定抗猴免疫缺陷病毒(SIV)衣壳蛋白p27单克隆抗体(MAb)p27一A5、p27一C7和p27．D2所识别的抗原表位，本研究通过间接ELISA法相加试验对这3株MAbs结合抗原表位进行初步分析，并利用部分重叠的短肽对MAbs的结合抗原表位进行鉴定。结果表明p27一C7和p27一A5的结合抗原表位位于p27蛋白的aa61~aa76(氨基酸序列为SEGCTPYDINQMLNCV)；p27．D2的结合抗原表位则位于aal91～aa206(氨基酸序列为EQTDAAVKNWMTQTLL2~)。该结果为进一步深入了解p27的抗原

3、特性和建立该蛋白的检测方法奠定了基础。关键词：猴免疫缺陷病毒；p27蛋白；单克隆抗体；表位鉴定中图分类号：$852．65文献标识码：A文章编号：1008．0589(2011109．0738．04_ld_ent●‘lt，‘lCat●0lOnOt，mOnoc。lona●lantml。b0d。_lesa_nstt。heep。itopes0nsimianimmunodeficiencyvirusp27capsidproteinLILiang，LINYue—zhi，NALei，TANGYan-dong2，LVXiao-ling，Z

4、HOUJian—hua，QUJuan~uan(1．CollegeofLifeScience，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China；2．StateKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechnologyHarbinVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Ha~in150001，China)Abstract：Inthisstudy，threemonocl

5、onalantibodies(MAb)againstthep27capsidproteinofsimianimmunodeficiencyvirus(SlV)weredeveloped，designatedp27一A5，p27一C7andp27一D2．Theepitopesonp27totheseMAbswereidentifiedwithsynthesizedshortpeptidesusingindirectELISA．TheresultsshowedthatMAbofp27一A5andp27一C7recognize

6、dthesameepitopofp27，whichwaslocatedwithinsitesofaa61toaa76(SEGCTPYD1NQMLNCV)．Inaddition，theMAbp27一D2reactedwithanotherepitopofp27thatwaslocatedwithinsitesofaa191toaa206(EQTDAAVKNWMTQTLL)．Theseresultswouldbeusefulfor~rtherstudyofp27theantigenicpropertiesandthedeve

7、lopmentofserologicaldetectionmethodsforSIV．Keywords：simianimmunodeficiencyvirus；p27protien；monoclonalantibody；antigenicepitope猴免疫缺陷病毒(Simianimmunodeficiencyvirus，均与HIV十分相似_21。SIV)是猴获得性免疫缺陷综合征(SAIDS)的主要致SIV的结构蛋白包括核心蛋白(Gag)、酶蛋白病病毒it]。SIV与人类免疫缺陷病毒(Human(Po1)、囊膜蛋白(En

8、v)。而核心蛋白主要是由基质蛋immunodeficiencyvirus，HIV)的基因同源性很高，白p17、衣壳蛋白p27、核衣壳蛋白p9和p6构成。其形态、理化特性、分子生物学特性和致病机制衣壳蛋白p27构成SIV病毒粒子双层壳的内壳，相*Correspondingauthor收稿日期：2011-02—14基金项