全氟辛酸致小鼠肝脏氧化损伤的实验-论文.pdf

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1、第3O卷，第6期光谱实验室Vo1．30，No．62013年11月ChineseJournalofSpectroscopyLaboratoryNovember，2013全氟辛酸致小鼠肝脏氧化损伤的实验①刘辉王力吕卉“张梦媛“赵文红。(蚌埠医学院生物科学系安徽省蚌埠市东海大道2600号233030)“(蚌埠医学院预防医学系安徽省蚌埠市东海大道2600号233030)摘要研究了低(1mg／kg／d)、中(5mg／kg／d)、高(25mg／kg／d)三个剂量组全氟辛酸(Perfluorooctanoicacid，PFOA)致小鼠肝脏脂质过氧化损伤的作用。结果发现，PFOA能抑制小鼠体重的增长，对

2、肝组织造成一定的脂质过氧化损伤。各组小鼠出现不同程度的体重增长缓慢甚至减轻，中、高剂量组出现明显的减轻(P

3、业产品引。近年来，随着检测仪器的不断改进，越来越多地方的环境介质中发现了PFCs的存在，PFCs具有很高的生物蓄积性，会随着食物链的延伸而产生生物放大效应口]。从我国部分城市自来水、地表水、地下水和海水中均检测到PFCs，表明我国水环境中普遍存在着PFCs污染。随着经济社会的发展，越来越多地面临使用PFCs带来的污染。全氟辛酸是PFCs中最常见的一种，作为一种新型持久性有机污染物，其研究已成为近年来毒理学的研究热点。相对以往的相关实验，本实验采用较低浓度的PFOA，研究其对小鼠肝脏氧化损伤的作用。2实验部分2．1仪器与试剂722s型分光光度计(上海分析仪器厂)；FA2004型电子天平(上

4、海越平科学仪器有限公司)；DY89一I型电动玻璃匀浆机(宁波新芝有限公司)；KDC一160HR型高速冷冻离心机(科大创新公司)。PFOA(CAS号335—67—1，纯度96，分析纯，美国Sigma—aldrich公司)；超氧化物歧化酶(Superoxidasedismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathioneperoxidase，GSH—Px)、山梨醇脱①安徽省蚌埠医学院预防医学特色专业专项基金；安徽省高校优秀青年人才基金(2012SQRLOg1)；蚌埠医学院科研课题(Bykyl203)②联系人，电话：(0552)3175901；传真(0552)3175216；E—

5、mail：lilywang990@aliyun．com作者简介：刘辉(1983-)，男，安徽省凤阳县人，讲师，硕士，主要从事毒理学、分子生物学方面的研究。收稿日期：2013—06—13；接受日期：2013—06—18第6期刘辉等：全氟辛酸致小鼠肝脏氧化损伤的实验氢酶(Sorbitoldehydrogenase，SDH)、乳酸脱氢酶(Lactatedehydrogenase，LDH)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、一氧化氮(Nitricoxide，NO)及考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。实验用水为双蒸水(ddH。0)。2．2实验动物ICR小鼠，SPF

6、级，6—8周龄，体质量20—23g。购自安徽省实验动物中心，合格证号码为scxk(皖)2011—002，于蚌埠医学院实验动物中心屏障系统饲养，光照周期为12：12h(昼：夜)，温度控制为2o一26℃，相对湿度为4o～6o，并具有独立通风循环系统，自由进食饮水。2．3实验方法2．3．1处理常规饲养1周后按单纯随机抽样方法分成4个实验组，每组1O只；分别为正常对照组(ddHO)、低剂量组(1mg／kg／d)、中剂量(5mg／kg／d)和高剂量组(25mg／kg／d)。每Et上午9时，通过不锈钢灌胃针连续灌胃14d，灌胃溶液体积为0．1ml／10g。每天称量1次，14d后称量，颈椎脱臼处死，取

7、出肝脏，用预冷生理盐水冲洗，分离周围脂肪及结缔组织，用滤纸吸干表面水分后用电子天平称量肝脏湿重，计算小鼠的肝脏比体质量系数。随后在液氮中迅速冷冻后转入一80~C冰箱中保存。肝脏系数==：肝脏质量(g)／体质量(g)×IOO。2．3．2肝组织匀浆制备取部分肝脏，称量，加4C预冷生理盐水制成1O的肝匀浆，于4_C，3000r／min离心10min，取上清液，按试剂盒要求，检测以下指标：小鼠肝组织匀浆MDA含量、SOD、GSH—Px、SD