埃索美拉唑对人胃上皮细胞抗氧化损伤的保护作用及分子机制研究-论文.pdf

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1、·1731··论著·埃索美拉唑对人胃上皮细胞抗氧化损伤的保护作用及分子机制研究胡杨，吴清，刘朝霞，傅念，阳学风【摘要】目的观察埃索美拉唑在氧化应激条件下对胃上皮细胞的保护作用，并探讨可能的分子机制。方法体外培养胃上皮细胞系AGC细胞，用不同浓度埃索美拉唑(07,1、0．5、1．0m1)处理8h，光泽精化学发光分析法检测其对活性氧(ROS)产生的影响，实时定量聚合酶链式反应法检测血红素氧合酶1(HO一1)和环氧化酶(COX)mRNA表达，Westernblotting法检测HO一1蛋白表达水平，比色法测定HO一1酶活性。结果AGS细胞与

2、埃索美拉唑孵育8h后，能显著抑制还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADpH)诱导的ROS产生。其中1．0g／ml埃索美拉唑能使ROS产生量降低(73．3±3．5)％。实时定量聚合酶链式反应结果显示，0．5ml埃索美拉唑处理后，HO一1mRNA增高8．2倍；1．0ml埃索美拉唑处理后，HO一1mRNA增高了38．4倍。不同浓度的埃索美拉唑刺激AGS细胞后，HO一1蛋白的表达量及HO一1酶活性随其浓度的递增而增高。埃索美拉唑处理后，AGS细胞内COX一1和COX一2mRNA表达水平无变化。而AGS细胞首先经30i~moL／L萘普生和罗非昔

3、布分别作用后，对HO一1表达无影响。结论埃索美拉唑可能通过上调HO一1的表达而发挥对胃上皮细胞的抗氧化保护作用。【关键词】埃索美拉唑；上皮细胞；胃；血红素氧化酶；环氧化酶【中图分类号】R975．2【文献标识码】Adoi：10．3969／j．issn．1007—9572．2014．15．011胡杨，吴清，刘朝霞，等．埃索美拉唑对人胃上皮细胞抗氧化损伤的保护作用及分子机制研究[J]．中国全科医学，2014，17(15)：1731—1734．[www．chinagp．net]ProtectiveEfectandMolecularMechan

4、ismofEsomeprazoleonHumanGastricEpithelialCellsCausedbyOxidativeIn-juryHU，uQing，LIUZhao—xia，eta1．DepartmentofGastroenterology，AffiliatedNanhuaHospital，UniversityofSouthChina，Hengyang421000，China【Abstract】ObjectiveToobservetheprotectiveeffectandmolecularmechanismofEsomepr

5、azoleonhumangastricep—ithelialcellsunderoxidativeinjury．MethodsHumangastricepithelialcelllineAGSwasculturedinvitroandwasincubatedwithdiferentconcentrationofEsomeprazole(0．1，0．5and1．0m1)for8h．Reactiveoxygenspecies(ROS)wasmeasuredbymonitoringlucigenin—derivedchemiluminesc

6、ence．mRNAexpressionofhemeoxygenase一1(HO一1)andcyclooxygenase(COX)weredeterminedbyrealtimePCR．TheenzymeactivityofHO一1wasdetectedbycolorimetryandtheproteinexpressionlevelofHO一1wasdeterminedbyWesternblotting．ResultsAfterincubatedfor8h，EsomeprazolecouldsignificantlyinhibitNA

7、PDHinducedROSproduction，and1．0g／mlEsomeprazolecoulddecreasetheROSproductionby(73．3±3．5)％．Real—timePCRresultsdemonstratedthat0．5and1．0mlEsomeprazolecouldincreasetheHO一1mRNAto8．2and38．4fold，re-spectively．AndEsomeprazolecouldalsoincreasetheenzymeactivityofHO一1inAGScellsind

8、ose—dependentmanner．However，expressionofCOX一1andCOX一2remainedunaffected，andCOX—inhibitors(30IxmoVLNaproxenorRo