DDP细胞顺铂耐药性的影响-论文.pdf

《DDP细胞顺铂耐药性的影响-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、圭生鱼筮卷第6期ChineseClinicalOncolo~．Jun．2014。Vo1．19．N0．6·481··论著·miRNA一192对非小细胞肺癌A549／DDP细胞顺铂耐药性的影响210011南京南京医科大学第二附属医院肿瘤科杨育才，刘晶，万里，刘凤珍，王鹤，王朝霞【摘要】目的探讨抑制microRNA一192(miR一192)在非小细胞肺癌A549／DDP细胞对顺铂(DDP)耐药性方面的影响及可能机制。方法通过实时荧光定量PCR(qRT—PCR)法检测人肺腺癌耐DDP细胞株A549／DDP及其亲本细胞株A549细胞中miR-192的表达水平，A549／DDP细

2、胞转染miR-192抑制剂(inhibitor)和miR一阴性对照(NC)48h后采用qRT．PCR检测转染效率，分别采用MTr法、克隆形成实验及流式细胞术检测转染48h后A549／DDP细胞对DDP的药物敏感性、细胞增殖能力及细胞凋亡变化，Westernblotting检测转染48h后细胞中Bax和Bcl一2的表达变化。结果miR．192在A549／DDP细胞中的表达水平高于A549细胞(P<0．05)；转染miR一192inhibitor48h后的A549／DDP细胞miR一192水平低于转染miR—NC者(P<0．05)；转染miR一192inhibitor后，

3、A549／DDP细胞的增殖能力减弱、凋亡细胞增多、DDP对其半数抑制浓度降低、Bax蛋白水平升高和Bcl一2蛋白水平下降，与转染miR—NC者比较，差异均有统计学意义(P<0．05)。结论抑制miR．192能够降低A549／DDP细胞对DDP的耐药性，其作用机制可能是通过增加细胞凋亡以及下调Bc1．2蛋白和上调Bax蛋白表达来实现的。【关键词】非小细胞肺癌；miR一192；顺铂；耐药性中图分类号：R734．2文献标识码：A文章编号：1009-0460(2014)06-0481—05ImpactofmiRNA-192forcisplatinresistanceofnon

4、-smallcelllungcancerA549／DDPcellsYANGYucai，Jing，ⅣLi，LIUFengzhen，WANGHe，WANGZhaoxia．DepartmentofOncology，theSecondAj~liatedHospitalofNanjingMedicalUniversity，Ⅳnng210011，ChinaCorrespondingauthor：WANGZhaoxia，E—mail：zhaoxiawang88@hotmail．con【Abstract】0bjectiveToexploretheefectofmicroRNA一192

5、(miR一192)inenhancingcisplatin(DDP)resistanceofnon—smallcelllung(NSCLC)A549／DDPcelllineandelucidateitsrelatedmechanism．MethodsThereal—timequantitativePCR(qRT—PCR)wasusedtodetectmiR一192expressioninA549cellsandA549／DDPcels．TheA549／DDPcelsweretransfectedwithmiR-192inhibitorormiR—negativecon

6、trol(NC)andqRT—PCRwasusedtotestthetransfeetioneficiency．DrugsensitivitytoDDP48haftertransfectionwastestedbyMTI?assay．Colonyformationassaywas,usedtodetecttheproliferationofA549／DDPceils48haftertransfec—tion．FlowcytometricanalysiswasusedtoobserveapoptosisofA549／DDPcells48haftertransfectio

7、nOlltreatmentwithDDP．Thepro—teinexpressionsofBaxandBcl一2inA549／DDPcellsaftertransfeetionweredetectedbyWesternblottingmethod．ResultsThemiR一192expressioninA549／DDPcellinewassignificantlyhigherthanthatinA549celline(P<0．05)．ThemiR一192expressionwassig-nificantlydecreasedat48haftertr