艾灸对类风湿关节炎模型大鼠滑膜细胞凋亡的影响

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1、第36卷第6期云南中医学院学报V01．36No．62013年12月JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine12．2013艾灸对类风湿关节炎模型大鼠滑膜细胞凋亡的影响彭传玉，胡玲△，吴子建，蔡荣林，何璐(安徽中医学院，安徽合肥230038)摘要：目的观察艾灸对类风湿关节炎模型大鼠关节肿胀度和滑膜细胞凋亡的影响。方法将80只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、艾油组，每组20只。除正常组外，其余3组大鼠建立类风湿关节炎模型。造模成功后，正常组和模型组不

2、予治疗；艾灸组予艾条悬灸；艾油组予艾叶精油涂抹。采用TUNEL法观察艾灸对类风湿关节炎模型大鼠滑膜细胞凋亡的影响以及大鼠关节肿胀度的变化。结果模型组大鼠关节肿胀度及滑膜细胞凋亡与正常组大鼠比较有统计学意义(P<0．01)。经治疗后，艾灸组、艾油组大鼠关节肿胀度和滑膜细胞凋亡指数较模型组大鼠均有所改善，其中，艾灸组大鼠与模型组大鼠比较关节肿胀度和滑膜细胞凋亡指数改善明显(尸<0．01)，同时艾灸组也优于艾油组。结论这些结果表明，艾灸疗法能够减轻大鼠关节肿胀度，并诱导滑膜细胞凋亡，对类风湿关节炎有很好的治疗作用。关键词：类风湿关节炎

3、；艾灸；细胞凋亡；艾油中图分类号：R245．81文献标志码：A文章编号：1000—2723(2013)06—0052—04类风湿关节炎(rheumatoidarthritis，RA)是以慢实验前将大鼠常规适应性喂养1周，按照《卫性、对称性、多滑膜关节炎病变为主要临床表现的生统计学》[7I中的随机数字表随机抽取2O只为正常自身免疫性疾病。临床上运用灸法治疗类风湿性关组，其余大鼠进行模型复制。造模成功的60只大鼠节炎报道较多，而且疗效显著Ⅲ。应用艾灸疗法治疗中按随机数字表随机分为3组，即模型组、艾灸组类风湿关节炎能够改善症状，控制病

4、情，减轻痛苦，和艾油组。恢复关节功能，有很好的前景【2-4]。类风湿性关节炎正常组和模型组大鼠不予任何治疗处理。其余的关节软骨和骨组织损害与滑膜细胞的过度增生2组大鼠，均参考《实验针灸学》【81‘‘大鼠穴位图谱”选活化和凋亡不足密切相关_5J。近年来越来越多的研取双侧“足三里”和“肾俞”。剪去穴区被毛，标记颜究表明细胞凋亡在自身免疫病的发病机制中起着色。造模成功后连续治疗15d，每日治疗1次，“足三重要作用[61。里”和“肾俞”交替使用。艾灸组大鼠予直径5mm的本文通过建立大鼠类风湿关节炎模型，观察艾香烟型艾条悬灸(距穴区2cm

5、)，每穴20min；艾油组灸对类风湿关节炎模型大鼠关节肿胀度及滑膜细大鼠予艾叶精油穴位涂抹。整个实验过程均按照实胞凋亡的影响，并为艾灸治疗RA发挥温通效应的验动物伦理学的规定进行。作用机制提供可靠的理论依据。1．2材料与仪器1材料与方法弗氏完全佐剂(美国SIGMA公司，068K8761)；1．1动物与分组香烟型纯艾条(南阳市卧龙汉医艾绒厂，061205)；清洁级雄性大鼠，体质量180～200g，月龄3～4艾叶精油(南阳市卧龙汉医艾绒厂，专利号：月，80只，由南京医科大学实验动物中心提供，许可200830080127．4)；细胞凋

6、亡试剂盒(InSituDeath证号：SCXK(苏)2010—0004。DetectionKit，POD货号：11684817910)基金项目：安徽省中医药大学青年科学研究基金(NO：2013qn015)；国家973计划(NO：2009CB522905)；国家中医药管理局重点学科——针灸学科开放基金项目(NO：2011zjxk012)收稿日期：2013—10—23修回日期：2013—11—25作者简介：彭传玉(1984一)，女，安徽阜阳人，助教，研究方向：腧穴作用与艾灸。△通信作者：胡玲，E—majl：hulincm@126．e

7、om52第6期彭传玉，等：艾灸对类风湿关节炎模型大鼠滑膜细胞凋亡的影响自制铝合金一玻璃造模箱：1．2mx1．OmxO．8m；手件进行数据分析。各组间均数比较采用单因素方差掌型离心机LX一100(海门市麒麟医用仪器厂)；漩分析(One—wayANOVA)，组间均数的两两比较采用涡混合器QT—l(上海琪特分析仪器有限公司)；荧最小显著法(LSD)法。其中，P<0．05为组间有显著性光显微镜一Nikon80(新飞达光学仪器公司)；YLS一7C差异，P<0．01为组间有非常显著性差异。足趾容积测量仪(山东省医学科学院设备站)3结果1．3

8、模型复制方法3．1不同疗法对类风湿关节炎模型大鼠关节肿胀本实验采用“病证结合”的造模方法，即用风、度的影响寒、湿环境+生物因子复合造模方法。将大鼠放置在模型复制前，各组大鼠左后肢足趾容积基本在自制铝合金一玻璃造模箱内，超声雾化器控制箱一致，各组之间无明显差异(P