人体和动物、体外细胞培养中超过80%蛋白定量都使用其作.doc

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1、ELISA试剂盒是一种十分常用的定性定最方法，人体和动物、体外细胞培养屮超过80%蛋口定最都使用其作为检测的手段。ELISA试剂盒价格一般非帘昂贵，但各家试剂公司的质最却良莠不齐。ELISA的试剂盒有用于科研的，也有用于临床诊断的。应用于临床诊断的试剂盒必须有卫生部的许可文号，国家对应用于临床诊断的试剂盒有严格的规定和要求•制定相关的手则來管理试剂盒的质量。一、仔细阅读说明书，対说明书的内容有一个详细的了解。审查内容包括:III1.试剂盒的名称：ELISA试剂盒名称一般山“（物种）+（测定指标）+酶联免疫试剂盒（ELISA）”,物种和测定指标不能搞错，

2、否则买错了就是你的事情；另外有的试剂盒说明书试剂盒名称明显与坊在试剂盒上的名称不符，这要引起你的警惕。2.用途：应用于科研还是临床诊断，用于临床诊断的有卫生部的批准文号。3.测定原理：现在ELISA试剂盒除非是测定抗体的以外，一般使用的是双抗体夹心法，此种方法大多数用的是增强的双抗体夹心法，即使用生物索•亲和索系统，还有少数的指标可能使用竞争法，这类方法适用于半抗原的测定。具有复杂结构的多表位蛋口抗原，其双抗体夹心法屮的一个抗体必须用单抗，否则背景很高。当然如果两个都是单抗（这两个单抗针对不同表位），那么测定的线性范围就较宽，试剂盒性能就较好：一个用单

3、抗，一个用多抗，测定的灵敏度会较高。某些简单的化合物用ELISA测定时，因为没有两个或以上的表位，一般只能作为半抗原，只能用竞争法测定。如果你发现有测定简单化合物（如雌激索、NO、地高辛等）用双抗体夹心法作测定原理时，这个试剂盒你就要怀疑了。另外还要说明一步双抗体夹心法与两步双抗体夹心法的区别。一步双抗体夹心法的吸光度-剂量Illi线呈钟形，随着待则标木屮抗原浓度的增加而升髙至一定程度后，测定吸光度即随抗原浓度的增加而开始下降宜至不显色，即所谓的“钩状效应”（hookeHect）,也就是我们在免疫沉淀试验中所称的“带现象,5（zonephenomeno

4、n）o所以当使用一步双抗体夹心法时，样品浓度太高，有时会出现测不出來的现象，此时要作适当的稀释才能准确测定。4.试剂盒的组成：用双抗体夹心法作为测定的方法时，试剂盒的组成一-燉包括：已包被单抗的酹标板：一块，有96孔的，也有48孔的，可拆卸，外面有铝箔袋密封，打开后有干燥剂，实验时暂未使用的酶标条要连带干燥剂密封好，放在4C冰箱中妥善保存。而应用于科研的试剂盒，国家则没有出台相关的质戢管理规定，因此试剂盒质帚:也就无法保障。在这种情况下，许多劣质的试剂盒在市面泛滥，不少同行战友为此浪费了大量的时间和金钱，却没有得到一个良好的实验结果。下面给战友们介绍一

5、下如何判断试剂盒的质量，选购好的试剂盒。