临床医学论文-胃癌PTEN、VEGF与微血管密度相关性及意义.doc

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1、临床医学论文■胃癌PTEN、VEGF与微血管密度相关性及意义作者:唐咏梅黃明哲胡茂通朱献斐费哲为张一楚PTEN基因(phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosometen,PTEN),乂名MMAC1/TEP1基因,为第10号染色体同源丢失性磷酸酶■张力蛋白的抑癌基因[1]o而血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)能特异性刺激内皮细胞增殖,在血管新生屮扮演重要角色[2]。二者与肿瘤浸润、转移及血管新生(angiogenesis)有密切关系,在肿瘤的多步骤演进屮起重要作用[3]。PTE

2、N、VEGF基因表达与胃癌的关系,令人关注。本研究采用超敏SP免疫组化法,检测胃癌组织的PTEN、VEGF表达与微血管密度(microvasculardensity,MTD,结合临床病理学特征,以明确PTEN、VEGF表达与MVD的关系及其临床意义。1材料和方法1.1—•般资料收集本院2003年1月至2004年6月手术切除胃癌标本138例。其屮男91例,女47例,年龄30〜82岁,73例年龄超过60岁。按UICC标准,TNM分期I、II期80例,IILIV期58例;淋巴结转移数Ml个95例;伴有血管浸润49例;术前未接受放疗和化疗。1.2方法(1)取材制片:选取肿瘤细胞丰富,无

3、坏死组织的石蜡标本,毎一•蜡块连续切取三张4um厚切片。(2)染色步骤:采用SP超敏浓缩试剂盒,临用前稀释100倍;组织切片经二甲苯脱蜡、酒精水化,水浴小煮沸15min行抗原热修复;滴加适当稀释的第一抗体[PTEN(l:60),VEGF(1:100)和CD34(1:60)均为福州迈新产品],孵育60min;再滴加第二抗体,孵育15min,过氧化酶反应5min,以上反应均置于37°C培养箱。DAB显色,苏木素复染,封片。1.3结果判断在临床病理资料的双盲条件下,分别由二位经验丰富的病理医师,在肿瘤实质区选取8个视野,记数肿瘤细胞总数及阳性染色肿瘤细胞所占比例,独立判定结果,最后核实

4、确认。PTEN阳性表达为细胞浆染色;VEGF阳性表达为肿瘤细胞核染色成棕褐色;将阳性表达肿瘤细胞百分比W10%记为11〜25%记为+;26〜50%记为*>50%记为卄F。阳性细胞数>10%为结果阳性。1.4MVD测定采用CD34抗体标记血管内皮细胞,低倍镜下选取肿瘤浸润区域微血管数量最密集的视野,再在200倍视野范围计算3个视野的微血管数Fl,取其平均值作为MVD[4]。肿瘤区域凡是染成棕色的单个内皮细胞或内皮细胞簇,均作为一个血管计数。1.5统计学处理利用SPSS12.0forwindows软件进行数据处理,数值以(x土s)表示,显着性比较采用t检验和x2检验,P<0.05认为

5、有统计学意义。2结果2.1PTEN、VEGF的表达和MVD值PTEN在正常胃腺上皮表达阳性,阳性表达部位为肿瘤细胞浆,其PTEN表达阳性率为42.7%(59/138)。VEGF在正常胃腺上皮表达阴性,阳性表达部位为肿瘤细胞浆,其VEGF表达阳性率为85・5%(118/138)。采用CD34标记微血管清晰,定位确切。仅计数肿瘤细胞浸润区域,其MVD值范围在26〜85Z间,平均为45.77o2.2PTEN、VEGF表达和MVD与胃癌临床病理特征的关系PTEN表达阳性率在浸润深度超过肌层、淋巴结转移阳性、临床分期为1IIIV期者,分别为35.4%(29/82)、36.8%(35/95)

6、和29.3%(17/58),与对照组比较,呈显着性意义的低表达(PvO.05或PvO.Ol);在138例胃癌小,根据其分化程度分为分化型(diffcrcntiatdc)(包括屮/高分化管状腺癌、乳头状腺癌、粘液腺癌)与其它型(olhcrs)(包括低分化腺癌、粘液细胞癌、未分化癌)两组。VEGF表达阳性率在组织类型分化型、淋巴结转移阳性、伴血管浸润者,分别为95.2%、90.5%和93.9%,与对照组比较,呈显着性的意义高表达(P<0.05)o以MVD屮位数值为界,分为MVD低值组(MVD<42.5)和高值组(MVD>42.5),发现在浸润深度超过肌层和淋巴结阳性组,其MVD高组比

7、例分别达57.3%(47/82)、58.9%(56/95),与对照组比较,存在显着性意义(P<0.05,P<0.01);而与年龄、性别、组织类型、血管浸润、临床分期等均无相关性(P>0.05)。2.3胃癌PTEN、VEGF表达与MVD的关系PTEN表达与MVD之间具有非常显着性意义,PTEN表达阴性者MVD为48.52,显着高于PTEN表达阳性者的42.10,P<0.01;VEGF表达与MVD之间具有非常显着性,VEGF表达阳性者MVD为46.91,显着高于VEGF表达阴性者的3

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