补肾填精法治疗血虚动物实验的初步研究

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1、补肾填精法治疗血虚动物实验的初步研究陈维张黎敏周颖王海林王宪赞指导老师：庄剑青（上海屮医约大学02级七年制屮西医结合班，上海201203）［摘要］目的：比较补肾阳法、补肾阴法、阴阳双补法补血与常规补血法补血的效果。方法:制备小鼠急性失血性贫血（血虚）模型。造模后按组别分别灌服相应的药物，定期采血测定血色素（Hb）o结果：造模后各组动物Hb都呈现出由失血恢复到止常的变化趋势，但变化各口有其特点，补阴组起效最快，但后期效果不明显；阴阳双补组和补阳组后期效果明显。结论：补肾填精法能促进血虚模型小鼠Hb的恢复，补肾阴法起效快，补肾阳和阴阳双补法后期效果明显。［关键词］血虚；动物模

2、型；补肾阴；补肾阳；阴阳双补1引言血虚为临床常见的疾病之一。目前临床上最为常用的补血方法基本分为：补气生血、补脾生血、补肝养血、养心安神补血等常规补血法。然而，对于补肾补血法的效果研究比较少，动物实验还未见报道。屮医理论记载：肾藏精，精生髓，精髓是化生血液的基本物质，血Z源头在于肾。据此推断，补肾填精法能够治疗血虚。我们设计这个实验，一是要观察常规和补肾两类补血法哪种功效略胜一筹；另一方面，观察补肾阴、补肾阳和阴阳双补三种方法补血的效果。从而证明中医“肾主藏精而化血”的理论。2方法2.1材料选择方法：2.1.1实验对象：正常小鼠（18—22g）预实验20只，正式实验90只

3、，雌性，每天自食普通颗粒饲料，自由饮水进食，由上海中医药大学动物实验室提供。2.1.2仪器：UV7504紫外可见分光光度计，玻璃毛细管（内径约1.0ml）；1.5mlEppendorf管100只，小鼠固定器3个，20u1定量毛细管，小鼠灌胃器1个，1ml注射器4个，10ml移液管1根，试管35根，试管架一个，常用外科手术器械，棉花若To2.1.3药物与试剂：孰化高铁血红蛋白参比液，上海伊华医学科技有限公司，标准号：Q/SINS008-2003,注册号：国食药监械（试）字2003号第3050409；血红蛋口测定试剂盒（HiCN法），上海荣盛生物技术有限公司,标准号：YZB/

4、沪0577-40-2005,注册号：沪食药监械（准）字2005号第2400732号；鹿角胶，河南省四方药业有限公司,批号：050203；鳖甲胶，河南省四方药业有限公司,批号:040810；阿胶，山东东阿阿胶股份有限公司；生理盐水，肝索溶液，75%酒精。2.2实验操作方法2.2.1造模：采用失血性贫血模型：随机选取75只小鼠，用尾静脉采血法一次性使每只小鼠失血0.5ml（按《药理与中约约理试验》造模标准）。造模后，模型鼠的毛发蓬松枯槁，口主活动减少，躯干紧张度降低，耳廓色白，心率加快。2.2.2配制中药参照《药理与中药药理试验》（上海科学技术出版社）可知小鼠服药剂量=人服药

5、剂量X人的转换因子/鼠的转换因子，按人的服药量7.5g/50kg计算得小鼠服药剂量为17.5mg/10go按实验小鼠平均体重20g,每天灌胃量0.2ml,计算得中纱浓度为175mg/mlo按此浓度，分别配制阿胶、鳖甲胶、鹿角胶溶液适量。2.2.3治疗：取15只小鼠作为正常对照组；其余小鼠造模合格后，随机分成五组，每组15只分别为：模型对照组；常规补血组，灌服阿胶；补肾阴组，灌服鳖甲胶；补肾阳组，灌服鹿角胶；阴阳双补组，灌服鳖甲胶和鹿角胶混合液（体积比1:1）。服药组小鼠放血24h后每天分别灌服用相应的补血^0.2ml,连续给药8天，直至与止常对照组无差异。2.2.4观察指

6、标：（1）体重：在实验开始前和结束时分别观测小鼠的体重变化。（2）Hb测定：采用尾静脉放血法，用定量吸管分别抽取每只待测小鼠20^1血液,滴入放有5山1文齐氏液的试管中，做好标记。将待测液放入UV7504紫外可见分光光度计，设定波长为546nm,测定吸光率，通过换算，得出每个小鼠血液的Hb值。实验前随机测量正常鼠的Hb值，造模后24小时随机测量失血小鼠的Hb值，开始服药后分别测定各组小鼠第Id、2d、4d、6d、8d、lid的Hb值，并与失血模型组、正常组小鼠对照。2.2.5统计学处理：实验数据采用SPSS9.0统计软件进行单因素方并分析，结果以均数土标准并表示。3实验结

7、果图1中药对血虚小鼠血红蛋白的影响806011O14201100正常对照组模型对照组T-阿胶组*能甲胶组鹿角胶组—阴阳双补组80before24hId2d4d6d8dlid中药对血虚小鼠Hb的影响结果为，起效速度：鳖甲胶组〉鹿角胶组邓可胶组〉阴阳双补组，后期效果：阴阳双补组〉鹿角胶组邓町胶组〉鳖甲胶组。实验前后体重增长对比30hillill□实验前□实验片0各组小鼠体重都有不同程度的增长，止常对照组和模型对照组实验前后体重增长幅度较大。4讨论4.1实验数据分析1•与止常组对比，放血后，各组Hb同等幅度降低，造模成功。服药第一天