环境微生物实验指导

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1、微生物实验室安全守则基本原则：1.在实验台上不可放置任何非实验必须的物件或私人用品。2.每次工作开始及终止时，必须清理并用杀菌液擦拭实验台面（杀菌液的种类及浓度可参考表1中所列，最常用的为70%酒精水溶液）。表1、常用杀菌药品名称及其溶液的浓度名称浓度有机碘复合物100〜150mg/1四级胺化合物700-800mg/1酚0.5~1%酒精70%（w/v,溶于水）甲醛水溶液8%（w/v,溶于水）甲醛酒精水溶液8%（w/v,溶于70%酒精水溶液）3.在操作过程中绝不可抽烟、吃东西。4•在操作过程中必须穿上清洁的实验服，若蓄长发须

2、将长发束好，在实验室中任何时候皆应有整齐的装束。5•实验室内的各种培养基、仪器，尤其是各种实验的样品及微生物培养，皆不可任意移至实验室外。6.实验室內任何一种微生物样品，在处理时均须遵守下列事项：◎决不可用口吸取任何一种微生物样品。◎如果微生物样品打翻，必須以吸满杀菌液的卫生纸加以覆盖15分钟后，卫生纸才可移除，并依照一般微生物实验室的废弃物加以处理。◎任何微生物样品在室內搬移时都必须加盖。7•在任何操作过程的开始前及终止后，双手都必须用清洁剂清洗（例如：70%的酒精水溶液）。微生物实验室內，任何微生物的样品、废弃物（对具

3、感染性的废弃物应特别注意）都必须高温高压灭菌后，才能以一般垃圾处理。操作时注意事项：1•机器运转中如有不正常现象，应立即报告实验老师或任课教师，若时间急迫，可先切断电源。2•发现仪器故障者，应在机器上清楚标示，尽到告知义务，以免发生危险。3•任何药品使用前需详知其性质及使用方法，配制或使用有毒物品需戴手套口罩等操作，挥发性溶剂则需在通风柜内使用，并应随时加盖，以免发生危险。4.挥发性溶剂如酒精、丙酮、乙瞇、苯、二硫化碳、冰醋酸、石油瞇、甲苯、二甲苯等均易燃烧，故切勿靠近火焰。不溶于水的有机溶剂着火时，切勿以水灭火，以免更助

4、长火势蔓延。5•不得将纸屑、玻璃碎片等流入排水管。6.当加热试管内物质时，为避免烧破试管或致使试管內物质喷出，应常旋转试管或避免仅加热一处，切勿将试管口对着自己或邻座同学，以免试管内物质喷出伤害自身或其他同学。7•稀释浓硫酸或其他强酸应徐徐将浓硫酸加入水中，并轻轻摇晃混合，切勿加水于酸中，以免因稀释时产生大量的热，致硫酸因沸腾而溅出。由上述各项可看出，在一般微生物实验室中，不论是何种操作过程或样品、废弃物的处理，都应以无菌操作技术为最基本的工作原则，因为只有当所有的操作步骤及处理方法均合乎无菌操作技术的要求时，才能使工作者

5、及其工作环境可能受到的污染程度降至最低,相对地便能使其工作的安全性提至最高。实验一普通显微镜的使用一，目的与要求了解普通光学显微镜的结构、功能掌握显微镜的原理和使用方法二，材料与仪器1.显微镜、擦镜纸等2.植物及微生物标本片3.香柏油、二甲苯三，操作步骤显微镜结构精密，使用时必须细心，要按下述操作步骤进行。（一）观察前的准备1、显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。2、将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图纸。3、调节光照不带光源

6、的显微镜，可利用灯光或自然光通过反光镜来调节光照，但不能用直射阳光，直射阳光会影响物像的清晰并刺激眼睛。将10x物镜转入光孔，将聚光器上的虹彩光圈打开到最大位置，用左眼观察目镜中视野的亮度，转动反光镜，使视野的光照达到最明亮最均匀为止。光线较强时，用平面反光镜，光线较弱时，用凹面反光镜。自带光源的显微镜，可通过调节电流旋钮来调节光照强弱。4、调节光轴中心显微镜在观察时，其光学系统中的光源、聚光器、物镜和目镜的光轴及光阑的中心必须跟显微镜的光轴同在一直线上。带视场光阑的显微镜，先将光阑缩小，用10X物镜观察，在视场内可见到视

7、场光阑圆球多边形的轮廓像，如此像不在视场中央，可利用聚光器外侧的两个调整旋钮将其调到中央，然后缓慢地将视场光阑打开，能看到光束向视场周缘均匀展开直至视场光阑的轮廓像完全与视场边缘内接，说明光线已经合轴。切忌用单手拎提；且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或记录。（二）低倍镜观察镜检任何标本都要养成必须先用低倍镜观察的习惯。因为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定检查的位置。将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物镜

8、调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢升起镜筒（或下降载物台），直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰为止。用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。在任何时候使用粗调节器聚焦物像时，必需养成先从侧面注视小心调节物镜靠近标本，然后用目镜观察，慢慢调节物镜离开标本进行准焦的