细胞生物实验指导(精)

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2、Ja本实验指导是在龚宁所编《细胞生物学实验指导》（2003年2月）的基础上修订而成，此次修订是根据实验内容的变化进行的，删除了已经纳入《生物技术大实验》的内容，增设了微分于涉差显微镜的使用、屯子显微镜演示、细胞凋亡等内容。木实验指导编写过程屮参考了杨汉民主编《细胞生物学实验》（1997年7月第二版）、李素文主编《细胞生物学实验指导》（2001年10月第一版）和中国农业大学生物学院所编《细胞生物学实验指导》（2000年4月），设置了15个实验，使用时可根据当时的具体情况选作10个。出于编者的水平冇限，本指导中难免错漏之处，

3、恳请使用本指导的师生提岀批评和建议，以便及时修改。编者2007年1月3日细胞生物学实验指导目录实验一细胞形态结构的观察及大小测定1实验二微分干涉差显微镜的使用2实验三口腔上皮细胞的荧光观察4实验四叶绿体的提取5实验五植物材料中DNA的提取6实验六细胞膜的渗透性8实验七光镜下植物细胞骨架的制片技术及观察10实验八线粒体和液泡系的超活染色与观察11实验九DNA的细胞化学反应Feulgen反应13实验十RNA的细胞化学反应——Unna反应15实验十一小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察17实验十二联会复合体的染色与观察18实验十三去壁低渗法制备植

4、物染色体标本19实验十四细胞凋亡22实验十五透射及扫描电镜演示实验23实验一细胞形态结构的观察及大小测定一、实验目的：1、观察几种细胞的形态结构2、掌屋用测微尺测定细胞大小的原理和方法二、实验原理：测微尺分物镜测微尺（简称物微尺或台微尺）和目镜测微尺（简称目微尺），两者配合使用，可以测量细胞大小。口微尺是一个可以放在口镜内的特制玻璃园片，园片屮央刻有一条直线，此线分为若干格。物微尺为一•载玻片中央封固的小尺，长1血，被等分为100格，长为0.01mm（10Lini）o当测量细胞大小时，不能用物微尺直接测量细胞，而只能使用目微尺。因目微尺

5、测量的细胞是经物镜放大后的像，而它每格所代表的实际长度随物镜的放大率而变，在测量时需要先用物微尺来标定，求出某一放大率时目微尺每格所代表的实际长度，然后再用以测定细胞大小。将物微尺放在显微镜的载物台上，小心转动目镜测微尺，移动物微尺使两尺平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度重合处，记录起点线到重合线Z间的各尺的刻度数（格数），按下式计算，在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度：物微尺格数口微尺每格所代表的实际长度二X10um目微尺格数例如：目微尺是100格，其对应的物微尺是80格，则目微尺每格所代表的实际长度为80/100X10=

6、8um0测量某一细胞吋，如果口微尺测得其横径为5格，则此细胞横径为8X5二40um。三、实验用品：普通光学显微镜载玻片盖玻片镶子消毒牙签烧杯吸管0.9%生理盐水蒸憾水吸水纸。四、实验材料：口腔黏膜上皮细胞；洋葱内表皮；葫芦蘇叶片；保存于阿氏液中的鸡血；甜椒五、方法步骤：（一）、细胞形态结构的观察：1、人口腔上皮细胞的观察：1）、在洁净的载玻片屮央，滴一滴生理盐水。2）、用消毒牙签的一端，在漱净的口腔侧壁上轻轻地刮几下。3）、把牙签上附有碎屑的一端，放在载玻片上的生理盐水滴中涂抹几下。4）、用蹑子夹起洁净的盖玻片，将它的一边先接触载玻片上

7、的生理盐水滴，然后，轻轻地盖在水滴上。5）、用显微镜观察细胞形状，细胞呈扁平鳞状。2、取洋葱内表皮，同上法制作临时装片（将生理盐水换成蒸1：留水），用显微镜观察，可见长条状的洋葱内表皮细胞3、取葫芦薛叶片，制作临时装片（制作方法同洋葱内表皮），用显微镜观察，可见内含许多叶绿体的叶细胞，细胞呈什么形状？4、制作鸡血涂片，用显微镜观察红细胞5、取甜椒一片，用刀片刮去杲肉，将表皮制成临时装片，用显微镜观察表皮细胞，能看见胞间连丝吗？（二）、细胞大小的测定：1、将口微尺放于口镜内2、将物微尺放在显微镜的载物台上3、小心转动目镜测微尺，移动物微尺

8、使两尺平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度重合处4、记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数（格数），按下式计算，在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度：物微尺格数目微尺每格所代表的实际长度二X10um目微尺格数5、将制作的各种细胞临时装片置于载物台上，测定细胞的大小（包描氏径和短径）。六、注意事项：1、制作临时装片时避免产生气泡2、用物微尺标定的目微尺每格长度的数值代表在某一放大系统下的情况，这一数值会随物镜的放大率而改变，因此，在什么放大倍数物镜下标定的目微尺只能在同一放大倍数的物镜下测定细胞的大小。七、作业：1、绘出你所观察到的

9、洋葱表皮细胞和葫芦蘇叶细胞图，指出各部分的名称。2、列表说明你所测出的几种细胞的大小。实验二微分干涉差显微镜的使用一-用微分干涉差显微镜观察口腔上皮细胞一、实验目的：1.了解微分干涉差显微镜观察活细胞的原理