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时间:2019-10-19
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1、HIV感染的检测3A组检测的重要性2任何错误的诊断,包括假阳性或假阴性,都会对被检者甚至对家庭和社会都产生十分重要的影响艾滋病诊断的一项重要指标,也是控制HIV传播和控制艾滋病流行的重要手段检测的目的3诊断为确定个体HIV感染状况,包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。监测为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势,检测的人群包括各类高危人群和一般人群血液筛查为防止输血传播HIV而进行的检测,包括献血员筛查和原料血浆筛查。临床治疗和预后的判断疗效观察和耐药性监测HIV感染的实验室检测4初筛试验:酶联免疫吸附(EL
2、ISA)、凝集试验、唾液、尿液检测卡以及斑点印迹试验等确认试验:免疫印迹法(WB)、免疫荧光试验(IFA)、条带免疫试验以及放射免疫沉淀试验(RIPA)病毒分离培养电镜形态观察病毒抗原检测病毒核酸检测(HIV核酸定性检测、HIV-RNA定量测定)常用HIV病原学检测方法:常用HIV抗体检测方法:其他:CD4+/CD8+Tcell计数等常用HIV病原学检测方法5病毒分离培养电镜形态观察病毒抗原检测病毒核酸检测(HIV核酸定性检测、HIV-RNA定量测定)常用HIV病原学检测方法:由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅
3、抗原检测和病毒核酸检测可用于临床诊断。分离及培养HIV需要在特定的P3实验室(生物安全防护三级实验室)进行,且HIV的分离率在30%~60%,这项试验仅用于HIV株的保存和科学研究,不适用于HIV病毒的检测。病毒抗原检测6窗口期:HIV感染人体后有一段窗口期,在这段时期病毒抗体不能被检出,但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒。HIV-1感染机体后,感染者血液中最早出现的是病毒gag基因表达产物p24抗原,然后才出现相应的特异性抗HIV抗体,以后随抗体滴度的升高p24抗原含量呈逐渐下降的趋势以至检测不出。在病情发展到AIDS期,病毒大量复
4、制,机体免疫力下降,所产生的抗体不足以中和病毒抗原时,p24抗原在血中又可检测出。——P24抗原检测病毒抗原检测方法:以P24单克隆抗体包被微孔板,加人待检标本孵育,待检标本中若存在P24抗原,则被“捕捉”结合于包被抗体,然后依次加入生物素化的抗HIV多克隆抗体、链亲合素化的辣根过氧化物酶和反应底物显色,最后用酶联免疫检测仪测定OD值判断结果。应用:血液及其他体液标本中P24抗原的检测可以缩短窗口期,有助于HIV-1的早期诊断、预后判断及评价抗病毒治疗的效果,具有良好的实际应用价值。——ELISA检测P24抗原病毒抗原检测结果报告和解
5、释(局限性)8HIV-1P24抗原的阳性结果必须经过中和试验确认HIV-1P24抗原阳性仅作为HIV感染的辅助诊断依据,不能依此确诊HIV-1P24抗原阴性结果只表示在本试验中无反应不能排除HIV感染点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本病毒核酸检测RT-PCR定性试验是否存在病毒核酸定量实验血液中病毒复制水平病毒核酸检测核酸序列扩增试验(NASBA)逆转录PCR试验(RT-PCR)分支DNA杂交试验(bDNA)荧光定量PCR试验10病毒核酸检测婴儿HIV感染的诊断检测HIV前病毒DNA是婴儿HIV感染诊断首选的方法,与病毒
6、培养和随访的符合率达到95-100%。HIV感染的早期诊断感染以后1-2周就可用PCR方法检测出HIV基因,比抗体出现的时间提前,使窗口期大大缩短,有利于早期诊断。HIV抗体检测不确定结果的诊断有助于及时阐明HIV抗体的不确定结果是早期HIV感染还是非特异性反应,在迫切需要诊断结果的时候很有用处。——定性检测主要用途11病毒核酸检测辅助诊断在一般情况下,HIV抗体检测足以对HIV感染与否做出正确诊断,但在特殊情况下,单纯抗体检测不足以完成明确的判定,如出现某些非典型的抗体反应形式,特别是不确定反应时,RNA的测定可提供非常有用的证据。
7、虽然单纯使用RNA测定不能完全确定感染与否,但当RNA测定出现较高拷贝数的阳性结果时(>3,000c/ml),感染发生的可能性非常大。病程监控根据HIV感染发生后病毒载量具有一定的变化规律,并且这种变化与疾病的进程有着密切的相关性。因此定期进行病毒载量的检测有助于确定疾病发展的阶段,以确定相应的治疗方案。——定量检测主要用途指导治疗方案及疗效判定临床实践证明,并非在任何情况下HIV感染者都应该进行抗病毒治疗。通常在病毒载量达到一定水平后(如>3500050000c/ml)抗病毒治疗才具有良好的效果。在进行治疗后,通过病毒水平的检测才
8、能确定治疗是否有效,通常在治疗前后病毒水平降低0.5log以上才被认为临床有效。预测疾病进程HIV感染后疾病进程与病毒载量的关系十分密切,观察HIV感染者病毒RNA水平可大致预测其发病的可能。12HIV感染的实验室检测1
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