《细胞工程的复习》PPT课件

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1、知识回顾（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的，然后改变植酸酶的，从而得到新的植酸酶。（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是。请简述获得转基因植株的完整过程。空间结构氨基酸序列农杆菌转化法外源植酸酶基因→农杆菌→大豆细胞→大豆植株再生→鉴定（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过方法，从而一次得到多个转基因猪个体。（4）若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？显微

2、注射法胚胎分割减少环境中磷的污染，但基因可能扩散到环境中转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶，对进行切割。PstⅠ、EcoRⅠ含抗病基因的DNA、质粒（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中有，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的。抗卡那霉素基因全能性脱分化、再分化细胞工程的复习专题

3、2细胞工程1、概念:应用的原理和方法研究的水平研究的目的细胞生物学和分子生物学细胞整体水平或细胞器水平按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品2、分类植物细胞工程动物细胞工程所采用技术的理论基础植物细胞工程通常采用的技术手段植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞的全能性植物细胞工程(离体的植物器官、组织或细胞)脱分化再分化愈伤组织根、芽（胚状体）植物体培养条件：离体、含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适合的光照等外植体举例：花药离体培养基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株细胞工程中培育的“番茄-马铃薯”杂种植株1、植物组织培养植物A细胞植物B细胞去壁原生质

4、体A原生质体B原生质体融合融合细胞再生壁杂种细胞脱分化去壁的常用方法：酶解法（纤维素酶、果胶酶等）原生质体融合方法：物理法：离心、振动、电刺激等化学法：聚乙二醇（PEG）融合成功的标志人工诱导筛选愈伤组织杂种植株再分化2、植物体细胞杂交的过程（1）植物繁殖的新途径1）微型繁殖（快速繁殖）2）作物脱毒3）神奇的人工种子（2）作物新品种的培育1）单倍体育种2）突变体的利用3）转基因植物的培育（3）细胞产物的工厂化生产3、植物细胞工程的实际应用动物细胞工程常用的技术手段：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养、植物体细胞杂交强调：是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞培养动物细胞核移植动物

5、细胞融合单克隆抗体动物细胞培养技术动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液去掉组织间蛋白10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养部分细胞遗传物质改变动物细胞培养不能最终培养成动物体随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖1动物细胞培养植物组织培养和动物细胞培养的比较项目培养基结果应用植物组织培养动物细胞培养均需适宜的外界条件：PH,温度,营养及“无菌,无毒环境”固体，营养物质，蔗糖、植物激素培养成植株液体，营养物质，葡萄糖、动物血清培育成细胞系或细胞株（1）生产蛋白质制品（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）（2）用于某些器官移植（1）试管苗的快速繁殖（

6、2）无病毒植物的培育（3）生产药物等（4）人工种子（5）转基因植物的培育细胞A细胞B杂种细胞物理法、化学法灭活的仙台病毒2、动物细胞融合过程诱导动物细胞融合与植物原生质体融合的原理和方法是否基本相同？思考？制备单克隆抗体不具有繁殖性但具有抗原性主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法（同左）生物：灭活的病毒物理（离心、振荡、电刺激）化学（PEG）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较抗原动物体内刺激效应B抗体特点：产量低、特异性

7、差、纯度低、反应不够灵敏五、单克隆抗体1、常规抗体制备：一个B淋巴细胞：只分泌一种特异性抗体2、单克隆抗体杂交瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞：能无限增殖融合单克隆抗体培养抗原注入小鼠体内已免疫的B淋巴细胞骨髓瘤细胞筛选出杂交瘤细胞筛选出能产生特异性抗体的细胞群体外培养体内培养从培养液中提取从小鼠腹水中提取单克隆抗体细胞融合动物细胞培养单克隆抗体的制备(特定的选择培养基)主要用于疾病的诊断、治疗和预防。若在单抗上带上抗癌