饲用产朊假丝酵母的发酵培养条件研究

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1、《饲料工业》·2012年第33卷第6期功能性饲料饲用产朊假丝酵母的发酵培养条件研究12111李加友蔡丽阳于建兴沈洁陆筑凤(1.嘉兴学院生物与化学工程学院，浙江嘉兴314001；2.嘉兴市知味轩饲料有限公司，浙江嘉兴314001)摘要：产朊假丝酵母（Candidautilis）是优良的饲料蛋白，在发酵饲料生产中得到广泛应用。利用单因素比较试验和响应面分析方法，对产朊假丝酵母的发酵培养条件进行了优化，获得了二次回归模型，建立起产朊假丝酵母的最优发酵培养条件：葡萄糖19.86g/l、酵母膏9.56g/l、K2H

2、PO41.45g/l、MgSO41.12g/l，pH值5.5，发酵温度28℃。试验结果表明，该菌株具有生产速度快、易于培养的特点。关键词：产朊假丝酵母；响应面分析；发酵饲料中图分类号：TQ92文献标识码：A文章编号：1001-991X（2012）06-0057-04产朊假丝酵母（Candidautilis）作为GRAS（Gener－K2HPO41.0g/l、MgSO41.0g/l，pH值5.0。allyregardedassafe）生物可用于食品和药品行业，用1.3试剂和药品[1]于食用蛋白和谷胱甘肽等产

3、品的生产。德国、美国等蛋白胨和酵母膏为生化试剂，葡萄糖等其他化学一些国家和地区广泛地将产朊假丝酵母用于饲料行试剂为分析纯。业，作为优良的饲用蛋白质；或者用于秸秆、菜籽饼等1.4仪器设备[2-3]材料的发酵，用于饲用蛋白的生产或脱毒。产朊假DK-S24电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有丝酵母具有较强的转化无机氮为有机氮的能力，并且限公司生产）、FA1104N电子天平（上海精密科学仪器在其发酵过程中会产生大量的生物活性物质，因此，有限公司生产）、UV754紫外可见分光光度计（上海精利用产朊假丝酵母生产饲用添加

4、剂或发酵剂具有良密科学仪器有限公司生产）、Qyc-211全温空气摇床好的应用前景。（上海福玛实验设备有限公司生产）。利用单因素比较试验和响应面分析的方法对产朊1.5方法假丝酵母的发酵培养条件进行优化，为产朊假丝酵母1.5.1培养条件的单因素优化[4-5]在发酵饲料和富硒饲料产品开发中的应用奠定基础。利用单因素比较的方法对培养条件进行优化，根1材料与方法据发酵出发培养基，在单因素优化试验中，只改变其1.1菌种中一个待测因素，而其他条件保持不变。产朊假丝酵母（Candidautilis），本实验室保藏。1.5

5、.2响应面分析1.2培养基根据单因素试验确定的主要影响因素，利用Box-菌种活化培养基和菌种保藏培养基。Behnken组合设计的方法对其进行试验，然后利用响应麦芽汁培养基：称取150g麦芽，用600ml水在面分析方法对结果进行回归模拟，确定最优培养条件。65℃水浴锅中糖化4h。将糖化液用4~6层纱布过2结果与分析滤，将滤液放置在冰箱中静置过夜。去沉淀后收集上2.1产朊假丝酵母发酵培养条件的单因素试验о清液，调整其波美度至12Be'，121℃灭菌20min，pH2.1.1碳源对酵母菌生长的影响(见图1)值自

6、然。固体培养基另加1.5%的琼脂。1.6发酵出发培养基：葡萄糖10g/l、蛋白胨15g/l、1.41.20106D0.8O0.6作者简介：李加友，博士，副教授，主要从事高效生物转化0.4蔗糖的过程控制和机理研究。0.2葡萄糖0收稿日期：2011-12-051015202530基金项目：嘉兴市科技局项目“无抗生物发酵饲料研究与浓度(g/l)产品开发[2009BY3003]”图1碳源对酵母菌生长的影响57功能性饲料李加友等：饲用产朊假丝酵母的发酵培养条件研究酵母生长过程中需要添加适量的速效碳源，以利酵母发酵培

7、养的氮源。于菌体对环境的快速适应而缩短延滞期。由图1可2.1.3无机盐对酵母菌生长的影响(见图4)知，当葡萄糖和蔗糖浓度均为20g/l时，酵母的生物1.8量达到最大值，但葡萄糖对菌体生长的促进作用明显1.6较蔗糖要显著得多。酵母菌对葡萄糖的利用要更容易且更有效，但进一步增加葡萄糖浓度对酵母的生长有1.400K2HPO46一定程度的抑制作用，可能的原因是高浓度葡萄糖在D1.2MgSOO4前期促进酵母菌快速生长后，导致体系中溶氧不足，1CaSO4反而对菌体的生长产生了抑制作用，也有可能是过多NaCl0.8Mn

8、SO4的葡萄糖代谢后会产生有机酸，导致体系pH值下降，0.60.250.50.7511.251.51.75不利于酵母菌的生长。因此，选用葡萄糖为酵母菌生浓度(g/l)长的碳源，且适宜浓度为20g/l。图4无机盐对酵母菌生长的影响2.1.2氮源对酵母菌生长的影响(见图2、图3)无机盐是微生物生长的必需营养成分，因此，在1.4实际发酵过程中，需要考察不同无机盐对微生物生长1.21的影响。通过比较K2HPO4、MgSO4、CaSO4