不同来源肽消失规律的体外法研究

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1、畜牧兽医学报，#’’$，$%（%），$(#.$()"#$%&’$’()*%()%’$+,,$’#-*)#%.)*)#%###############################################################不同来源肽消失规律的体外法研究程茂基!，卢德勋"，蒋克纯!，王洪荣"，王岗"，赵秀英"，张海鹰"，郭文华"（!#安徽农业大学畜牧学院，合肥"$%%$&；"#内蒙古畜牧科学院，呼和浩特%!%%!’）摘要：利用体外瘤胃微生物批次培养研究了大豆肽、玉米肽和瘤胃液肽的消失规律。结果表明：随着培养时间的推移，三种肽的消失量与消失率均显著增加（!!%#%!，!!%

2、#%(），而消失速率却显著降低（!!%#%!）；当培养液中肽含量增加时，三种肽的消失量随之增加（!!%#%!，!!%#%(），消失速率也显著提高（!!%#%!，!!%#%(），而消失率却显著下降（!!%#%(）。对于不同肽源来说，瘤胃液肽的消失量和消失率以及消失速率显著高于大豆肽（!!%#%(）和玉米肽（!!%#%!）；大豆肽的消失量和消失率以及消失速率显著高于玉米肽（!!%#%(），并且在培养中后期彼此差异逐渐变小（!"%#%(）。肽的来源和结构不同，其消失规律也有异。关键词：肽；瘤胃微生物；消失规律中图分类号：)’"&#(文献标识码：*文章编号：%$&&+&,&-（"%%$）%-+%$&

3、"+%&瘤胃内肽的数量众多，仅二、三肽就达’-%%粉经过碱提、酸沉和胰蛋白酶与碱性微生物蛋白酶种。近年来，瘤胃内肽的消失代谢规律倍受关注。酶解后，通过分子截留量为!%%%78的中空纤维超一些学者研究了肽的分子量、疏水性和氨基酸构成滤器分离出寡肽，再中和、干燥成粉备用（见表$）。等因素对瘤胃内肽的消失规律的影响，并取得了不!#"#"瘤胃液肽的制备绵羊晨饲后!!"9内采凡的成绩［!，"］。然而，遗憾的是绝大多数试验仅仅集瘤胃液。采集的瘤胃液经纱布过滤后，在$,:和研究了人工纯化的试剂肽或酪蛋白肽消失规律，一!(%0条件下离心(4;<，再用大容量高速离心机在些常用饲料如豆粕、玉米蛋白肽的消失规律尚

4、未见!"%%%0条件下离心!(4;<。滴加-4=>／?58@A报道。同时，由于瘤胃内肽的来源、结构和性质与体溶液至BA值为!%#(时止，再置于!%(:烘箱中持外酶解的人工纯化肽有所不同，二者的消失规律是续$%4;<以去除5A。最终，滴加$4=>／?AC>溶$否存在差异尚不清楚。有鉴于此，本试验主要探讨液中和后，利用分子截留量为!%%%78的中空纤维了瘤胃内不同来源肽的消失规律，以推进新蛋白体超滤器分离出其它的大分子物质［(］。脱水后的瘤系的进一步完善，更加准确地预测反刍动物蛋白质胃液肽含有乙酸"&#-(44=>／?、丙酸,#(’44=>／的营养需求。?、丁酸’#-$44=>／?、5A$.5&

5、#’&40／?（见表$）。!"$试验设计!材料与方法试验采用单因子&水平设计，在瘤胃微生物培!"!试验动物、日粮与饲养管理养液中按$&40／?、1"40／?、!--40／?、"!&40／?、选(只体况良好，体重$’!-"/0的内蒙古半$"-40／?和-(%40／?浓度添加不同来源肽。各细毛羯羊，安装永久性瘤胃瘘管。试验羊精料为玉处理均按淀粉D氨基氮为-#(D!的比例添加玉米淀米豆粕日粮，能量维持需要-1%/2／/03%#1(，蛋白质粉作为微生物生长能源。维持需要$(%405／/03［%#1(］，按!#$6饲养水平!"%培养操作饲喂。试验羊单笼饲养，每日于1：%%和!&：%%两次培养装置系带有

6、受压可自动排气的橡皮塞密封饲喂，自由饮水，常规光照、驱虫与管理。离心管，置于恒温水浴摇床中备用。培养液按瘤胃!"#试验用肽的制备液：营养缓冲液为!D"的比例充分混和后配制而成，!#"#!大豆和玉米肽的制备豆粕粉和玉米蛋白瘤胃液在绵羊晨饲"9后于瘤胃不同位点中采集，营养缓冲液由缓冲剂、还原剂、常量元素和微量元素收稿日期："%%".(."’组成，其中微量元素溶液为EFG<<;0H试剂［$］。项目名称：国家自然科学基金项目资助（$,’&%%(,）作者简介：程茂基，（!,&’+），男，安徽六安人，中国科学院等离子所!"&样品预处理博士后，副教万方数据授，主要从事反刍动物营养用移液管量取$%4>经-层

7、纱布过滤的瘤胃-期程茂基等：不同来源肽消失规律的体外法研究!.!液，于!"#下$%&’离心%()*；准确量取+&(,上样品肽氮含量=样品酸解后总氨基酸氮含量>清液于-#下+&&&&’离心+&()*；又准确量取$.样品酸解前总游离氨基酸氮含量(,上清液，加入-(,+%/高氯酸（012）溶液，经电培养后单位时间肽氮消失量=培养初始肽氮浓动振荡均匀后静置$%()*于-#下+&&&’离心+&度>培养后单位时间肽氮浓度