当归多糖硫酸酯的合成及其对脾细胞增殖的作用

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1、当归多糖硫酸酯的合成及其对脾细胞增殖的作用作者：杨铁虹　贾敏　商澎　梅其炳　赵德化【关键词】当归多糖　　关键词:当归多糖;多糖硫酸酯;脾细胞增殖反应　　摘要:目的合成不同取代度的当归多糖硫酸酯;探讨氯磺酸对当归多糖硫酸酯化过程的影响和当归多糖及其硫酸酯对小鼠脾细胞增殖反应的作用.方法采用氯磺酸-吡啶法进行硫酸化修饰;BaSO4比浊法测定修饰物的硫含量;MTT比色法研究当归多糖及其硫酸酯对小鼠脾细胞增殖反应的影响.结果得到8种不同取代度的当归多糖硫酸酯，硫含量为93.7～171.4mgg-1，产率为0.737～0.884gg-1.当归多糖及其硫酸酯在剂量为5

2、00mgL-1和1500mgL-1时，给药组光密度明显高于对照组（P<0.01），作用与剂量有良好的正相关性.结论提高氯磺酸的比例，可以提高产物的硫含量，但收率降低.当归多糖及其硫酸酯对活化的T细胞增殖有直接促进作用.　　Keywords:AngelicaSinensispolysaccharide;polysaccharidesulfate;splenocyteproliferation　　Abstract:AIMTosynthesizeAngelicaSinensis7polysaccha-ridesulfateswithdifferentsul

3、furcontent;toexploretheef-fectofchlorosulfonicacidonsulfationinanexcessofpyridineandtheactionofAngelicaSinensispolysaccharidesulfates（APSs）onmousesplenocyteproliferation.METHODSAn-gelicaSinensispolysaccharide（AP-Ⅰ）wassulfatedbychlorosulfonicacid-pyridinemethod;theestersulfatewas　e

4、stimatedturbidimetricallyasbariumsulfate;theeffectsofAPSsonmousesplenocyteproliferationwerestudiedbyMTTassaysinvitro.RESULTSEightproductswithdiffer-entsulfurcontentwereobtained.Theyieldwas0.737～0.884gg-1，andthesulfurcontentwas93.7～171.4mgg-1.BothAP-ⅠandAPSsenhancedmousesplenocytep

5、ro-liferationatdose500mgL-1and1500mgL-1（P<0.01）.CONCLUSIONByincreasingtheratioofchlorosulfonicacid，sulfurcontentcanbeenhanced，buttheyieldwillbere-duced.AP-ⅠandAPSspossessdirectpromotingeffectsonactiveTcellproliferation.　　0引言7　　多糖作为非特异性免疫调节剂在抗肿瘤、抗肝炎、抗衰老等方面受到广泛关注.20世纪60年代以来陆续发现，一

6、些半合成硫酸化多糖，如香菇多糖、右旋糖酐、牛膝多糖的硫酸化衍生物，是多种有胞膜病毒的强大抑制剂，尤其是具有抗HIV-Ⅰ的活性，引起广泛的重视.在体内、外实验中，硫酸化多糖均表现出良好的抗病毒作用.日本学者研究了海藻中的天然硫酸化多糖，发现其在体内具有抗肿瘤作用，而体外无效［1］.硫酸化多糖的免疫促进活性被认为是整体情况下抗病毒、抗肿瘤作用的重要机制之一.中药当归（AngelicaSinensis，Oliv）中水溶性多糖具有增强免疫系统功能的作用［2］.我们选择从新鲜当归中提取的水溶性当归多糖（AP-Ⅰ），对其进行硫酸酯化修饰，探讨氯磺酸用量对收率和产物硫含

7、量的影响，并比较了当归多糖及其硫酸酯对小鼠脾细胞增殖反应的影响，为进一步研究其活性奠定基础.　　1材料和方法　　1.1材料①主要试剂及仪器:BECKMANDU-600型紫外可见分光光度计（USA）;DG3022A型酶联免疫检测仪（国营华东电子管厂）;PE-983红外光谱仪（WestGermany）;EZ550Q冷冻干燥机（USA）;氯磺酸、吡啶、二甲基甲酰胺（DMF）为国产分析纯，吡啶、DMF使用前重蒸并干燥;MTT，Sigma产品;RPMI1640培养液，Gibco产品.②动物:6～8周龄的BABL/c纯系小鼠，雄性，18～22g，由本校实验动物中心提供

8、.　　1.2方法①7当归多糖的提取:采自岷县的新鲜当归，经水煮、醇