纤维素酶产生菌的分离鉴定及产酶条件优化

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时间:2019-05-12

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1、华中师范大学硕士学位论文纤维素酶产生菌的分离鉴定及产酶条件优化姓名:魏艳红申请学位级别:硕士专业:生物化学与分子生物学指导教师:刘德立20090501⑨硕士学位论文IdASTER’STHESIS适起始pH为3.0,而产F队的最适起始pH为4.O;产EG和FPase的最适接种量为2%,产CBH的最适接种量达到了8%;培养时间均以5.6d为宜。在最适条件下培养,菌株EG、CBH和FPase的酶活达到了5275.3U/mL、8502.1U/mL和3619.1U/mL,是未优化前的1.42、1.35和1.32倍。本研究的第二部

2、分为产纤维素酶的沙漠极端环境放线菌分离筛选及多相分类鉴定。从新疆鄯善县典型沙漠土壤样品中分离到60多株放线菌菌株,通过对其纤维素酶产生定性测定,发现有9株沙漠放线菌均可以在以CMC-Na为唯一碳源的培养基上很好地生长,说明其可以产生纤维素酶。采用多相分类技术对筛选到的产纤维素酶放线菌进行了系统的分类研究,通过对其形态特征、生理生化特性、细胞壁化学组分以及16SrRNA基因序列分析等的研究,结果表明:9株产纤维素酶的放线菌中有7株属于链霉菌属(Streptomyces),只有菌株XJSS.08属于莫拉式菌属(Moraxe

3、lla),菌株XJSS。39属于拟诺卡氏菌属(Nocardia)。菌株XJSS一08和XJSS一39基本属于耐碱菌,不同于其他7株链霉菌,而且二者的胞壁类型也不相同。关键词:纤维素酶;真菌;放线菌;筛选;鉴定;液体发酵;酶活性AbstractCellulolyticenzymesareendo-glucanases(EG),exoglucanases(CBH)andcellobiases①G),andcelluloseiscompletelyhydrolyzedenzymaticallythroughthesynerg

4、isticactionofthreetypesofenzymes.Filterpaperenzymeactivity(FPase)representsthetotalenzymeactivityofvariousenzymeactivity.Cellulasehasaverybroadapplicationprospectsincludingenergy,feed,textile,food,industrialwashing,oilexploration,agdcuI:ture,medicineandSOon,SOth

5、eidentificationandscreeningofeellulase-producingstrainsandenzymeproductionconditionsresearchhaveimportantecologicalbenefits,economicandsocialsignificance.Fungi,bacteriaandactinomycetesCanallproducecellulase,thecomponentsofeellulaseproducedbymicro—organismsaredif

6、ferentduetothedifferenttypesofmicro-organisms,whichconstitutedifferentcellulosedegradationcharacteristics.Inthispaper,ontheonehand,westudyedthescreening,identificationandtheoptimumconditionsforcelluase-producingfungi,ontheotherhand,thescreeningandthepolyphasicta

7、xonomyofactinomycesisolatedfromthedesertwhichCallproducecellulasewerestudyed.Thescreening,identificationandtheoptimumconditionsforcelluase—producingfungiwerestudiedinthefirstpartofthepaper.Morethan50strainswhichcouldproducecelluasewereisolatedbyenrichingculturef

8、rom9samplesofCowdungcompost,collectedfromtheHuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan.Finallyaefficientcelluase··producingstrain(US—-F9)wasscreenedthroughthedeterminationo

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