调控s1p1受体信号通路对糖氧剥后星形胶质细胞增殖的影响

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1、技：Ｌ＞分类号Ｒ７４３密级公开ＵＤＣ６１０编号１〇％５．［ｒ，ＵＮＳ＇１ＴＹＯＦＳＯＵＴＨＣＨＩＮＡＩＶ巨民占、．ｅ哪讀硕主学位论文補韻卷進（专业学位）调控Ｓ１Ｐ１受体信号通路对糖氧剥后星形胶质细胞增殖的影喃研究生姓名：刘双凤指导教师：、职称占克斌主治医师学科专业：神经内科研究方向：脑血管病’所在学院：第二临床学院＇？－．．．Ｉ：．＇．■？？—■＃？？＊一ｔ＇．．起．二一丑五月＾義，ｉｌ零年＇｜＼＼Ｖｖ：、編齡调控ＳｌＰｌ受体信号

2、通路对糖氣剥夺后星形胶质细胞增殖的影响论文作者签名：丰昧＾指导教师签名；－的＼１论文评阅人１；谢鹏教授重巧民科大举巧阅人２：姚秀挪副教授第兰军睽乂学大坪戾協评阅人３；答辩委员会主席：肖波教榜中南大学湘雅民院委员１一；谢明教授南隹大学附属第戾協委贯２；唐小卿教授南坐大举委员３：魏麓吉教暢南化大学附属第二民院委员４；刘锋主巧民师南华大学附属第二戾院答辩日期；年月曰南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了

3、论文中特别加标注和致谢，的地方论文不包含外中其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包为获得南华含大学或其他单位的学位或证而使用过料。与我共工已在论文书的材同作的同志对本研的贡献究所作均。本人全意识到本声本人承担。中作了明确的说明明的法律结果完由；７＾Ｗ者签名作矿年月曰另ｆ松巧大论文版南华学学位权使用授权书本学位论文是本人在南华大硕±学位期间在导指导下成学位学攻读师完的论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得其它单位的。目名本人同意南的规：义发表华大学有关保留、使用学位论文，学校有定Ｐ权保留学位论文，允许学位论文被查阅和阅；学校

4、可借Ｗ公布学位论文的全部或部分、，可Ｗ或内容采用复印缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国湖南省家有关部口规定送交学位论文。意论文加入《±同学校将中国优秀博硕论文全学位文数据库》，并按《中±学位论文全文数据库国优秀博硕出版程》规定享受相关章。同中国科学信息技《权益意授权术研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数》，并通过网络会公众提服务。对于据库密的学位论文，解密后向社供信息涉适。用该授权者签：名：作导师签名主户巧、刮接斗＇４年ｅ（？年付＾日日中＞达ｙS1P1R抑制剂W146对糖氧剥夺后星形胶质细胞增殖的影响摘要：目的：观察鞘氨醇1-磷酸

5、1型受体（Thesphingosine1-phosphatereceptor，S1P1R）抑制剂W146对糖氧剥夺（Oxygen-glucosedeprivation,OGD）后星形胶质细胞增殖能力的影响。方法：取出生后3天内SD（Sprague-Dawley）乳鼠大脑皮层组织进行星形胶质细胞原代培养。取第三代细胞予以免疫荧光鉴定其纯度后进行后续试验步骤。采用免疫荧光双标法检测S1P1R在星形胶质细胞上的表达。将接种于培养皿中的细胞随机分为3组：CONTROL组、OGD/R组以及OGD/R+W146组。OGD处理细胞2小时模拟缺氧环境建立星形胶质细胞缺氧模型，恢复糖氧供应时CONT

6、ROL组细胞予以普通培养基、OGD/R组细胞予以培养基+等浓度药物溶剂（无水乙醇）、OGD/R+W146组细胞予以培养基+W146（10uM）。恢复糖氧供应后3h、6h、12h以及24h时间点行EDU、流式细胞术检测处于增殖期（S期）细胞比率；恢复糖氧供应后12h、24h、48h、72h时点，行噻唑蓝（MTT）检测星形胶质细胞增殖活性；蛋白免疫印迹法检测S1P1R蛋白表达水平。结果：S1P1R在星形胶质细胞上有表达。OGD后星形胶质细胞增殖能力升高：与CONTROL组相比，OGD组细胞增殖活性显著增加（P<0.05），处I于S期细胞比率明显增加，S1P1R蛋白表达水平上调，有统计学

7、意义（6h和12h，P<0.05）。与OGD/R组相比，W146干预后可抑制OGD/R组星形胶质细胞增殖能力，细胞增殖活性下降，处于S期的细胞比率明显降低（6h和12h，P<0.05）。W146干预后OGD/R+W146组S1P1R蛋白较OGD/R组下降（6h和12h，P<0.05）。结论:W146抑制OGD后星形胶质细胞的增殖。关键词：S1P1R；W146；OGD/R；星形胶质细胞；增殖IIEFFECTOFS1P1RECEPTORPATHWAYINHIBITIONO