基于斑马鱼疾病模型研究adar1基因的功能

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1、.上海交通大学硕士学位论文基于斑马鱼疾病模型研究ADAR1基因的功能作者姓名：姜承易指导教师：余红副教授学科专业：皮肤病与性病学答辩日期：2015年5月学号：11272297312015年5月基于斑马鱼疾病模型研究ADAR1基因的功能作者姓名：姜承易指导教师：余红副教授学科专业：皮肤病与性病学研究方向：培养单位：上海交通大学医学院附属新华医院申请学位：医学硕士关键词：遗传性对称性色素异常症；斑马鱼模型；色素；C-kit受体基金项目：本课题受国家自然科学基金面上项目（81472867）资助。2015年5月InvestigationofADAR1genefunctio

2、nanditsroleinDSHbyusingzebrafishmodelAuthorChengIChiangTutorProfessorHongYuSpecialtyMasterFundingsourcesShanghaiMunicipalNaturalScienceFoundation(No.12ZR1420000)ResearchdirectionGenodermatosisTrainingunitXinhuaHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicineDegreeapplied

3、forMasterofMedicineKeywordsDSH；zebrafish；melanin；C-kitSubmissionDateMay2015StudentNumber1127229731May2015上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，独立进行，是本人在导师的指导下研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，巧己在文中＾＾１明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。矣学位论文作者签名

4、：若斗日期尸於＾４句：年月Ｔ－ｒ户＇．－．．？Ｖ．．Ｖ．．＇ｊｂ．．Ｉ：辛■ｉ上海交通大学学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人段权上海交通大学可Ｗ将本学位论丈的全部或部分内容编入、有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密〇＜上方框＂＂（请在内打Ｖ），学位论文作者签名：

5、Ｘ指导教师签名：日期：月日兴／？邦ｔ基于斑马鱼疾病模型研究ADAR1基因的功能摘要目的：基于斑马鱼模型探讨ADAR1基因对遗传性对称性色素异常症(dyschromatosissymmetricahereditaria，DSH)的影响，以及DSH患者皮损色素沉着区和色素减退区是否存在细胞凋亡，是否存在C-kit表达差异，旨在研究DSH发病机制以对其预防和治疗提供帮助。方法：①收集一DSH家系，并对其进行ADAR1基因测序检测致病突变②利用morpholino技术下调斑马鱼adar1基因表达，并在斑马鱼48hpf及72hpf两个时间点观察引起的特异性表

6、型。③在48hpf及72hpf两个时间点观察各组斑马鱼尾部黑素含量。④各组分别收集50个样本并利用RT-PCR评估斑马鱼胚胎发育后8、16、28、32、36、52、64和76小时adar1基因表达，以证实adar1基因下调成功。⑤利用RT-PCR来探讨胚胎发育后48小时及72小时各组间wnt11、c-kit、mitf、rhoa及cdc42基因表达的差异。⑥收集DSH患者皮损标本并利用免疫组化技术探讨色素加深区和色素减退区C-kit表达的差异。⑦运用Tunel实验技术探讨DSH患者皮损色素加深区和色素减退区细胞的凋亡情况结果：①在DSH家系患者中发现ADAR1基因的

7、2号外显子处存在移码突变c.1019_1020delAG(p.Gln340Argfs*5)②DSH斑马鱼模型成功下调adar1基因的表达。③72小时adar1下调组斑马鱼尾部黑色素含量明显高于空白对照组和单加吗啡琳组。④adar1下调组中的斑马鱼在48hpf和72hpf黑素细胞细胞极性发生改变，而在72hpf出现黑素细胞迁移和分布异常。⑤下调斑马鱼adar1基因的表达导致胚胎48hpfrhoa和cdc42的下调，72hpfwnt11的下调，48hpf及72hpfmitf、c-kit的下调。⑥C-kit表达在DSH患者皮损色素沉着区明显高于色素减退区。⑦更多的细胞凋

8、亡现象发生