雄性高原鼠兔季节性繁殖的内外源调控机制.pdf

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1、分类号密级公开UDC学号20151013022青海师范大学硕士学位论文雄性高原鼠兔季节性繁殖的内外源调控机制研究生姓名王玉军导师姓名（职称）都玉蓉(教授)申请学位类别硕士学科专业名称生态学研究方向名称动物生理生态学论文提交日期2018年5月论文答辩日期2018年6月学位授予单位青海师范大学学位授予日期2018年7月答辩委员会主席评阅人专家一，专家二青海师范大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已

2、经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青海师范大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：青海师范大学学位论文使用授权声明青海师范大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。论文的公布（包括刊登）授权由青

3、海师范大学研究生部办理。研究生签名：导师签名：日期：I雄性高原鼠兔季节性繁殖的内外源调控机制摘要在哺乳动物中，繁殖受下丘脑-垂体-性腺轴的直接调控。虽然对非季节性模型动物的配子形成调控通路已建立，但对季节性繁殖的研究仍不完善。高原鼠兔（Ochotonacurzoniae）是栖息在青藏高原及周边地区的小型啮齿类动物。每年的4月-7月是成年高原鼠兔的繁殖阶段，并在冬季进入生殖静止期。本研究以青藏高原特有物种高原鼠兔作为动物模型，采用细胞生物学、分子生物学和转录组学等方法，在分子和细胞水平上对雄性高原鼠兔季节性繁殖的分子调

4、控机制进行初步探究。已取得研究结果如下：（1）繁殖期与非繁殖期成年雄性高原鼠兔生殖器官重量差异显著，组织形态学染色和未分化及分化型精原细胞标记免疫组织化学染色发现非繁殖期高原鼠兔生精小管中富集未分化精原细胞。（2）ELISA测定结果表明繁殖期与非繁殖期高原鼠兔褪黑素（Melatonin,MT），促性腺激素释放激素（Gonadotropin-releasinghormone,GnRH）和促黄体激素（LuteinizingHormone,LH）水平差异显著。经长光照，褪黑素受体抑制剂（Luzindole）、促性腺激素释放

5、激素处理后能重新启动精子发生。（3）功能性实验结果表明经睾酮注射处理后显著恢复非繁殖期高原鼠兔精原细胞分化并重新启动精子发生，睾酮的分泌受到短光照及褪黑素的抑制。（4）转录组学分析表明，调节维甲酸（RetinoicAcid,RA）生物合成与降解的基因的表达量差异显著。注射全反式维甲酸或CYP26B1的抑制剂（Talarozole），7天即可诱导精原细胞分化和恢复生精功能。综上所述，通过形态学分析和功能实验，结果表明高原鼠兔的精子发生能够响应光周期的变化以及褪黑素含量的改变，褪黑素通过控制下丘脑-垂体-性腺轴（Hypo

6、thalamic-Pituitary-GonadalAxis,HPGAxis）的活动，尤其是促黄体激素和睾酮的合成调控高原鼠兔的繁殖。维甲酸诱导精原细胞分化是调控季节性繁殖的关键环节，睾酮为维甲酸的生物合成和作用提供了一个适宜的环境。维甲酸直接控制精原细胞分化，从而决定季节性精子发生。表明高原鼠兔季节性精子发生主要是受褪黑素-睾酮-维甲酸信号调控。关键词：季节性繁殖，精子发生，褪黑素，睾酮，维甲酸Theendogenousandexogenousregulatorymechanismofseasonalreprodu

7、ctionofmalePlateaupikaOchotonacurzoniaeAbstractInmammals,reproductiveactivitiesaretightlycontrolledbythehypothalamic-pituitary-gonadaxis.Althoughpathwaysregulatinggametogenesisinnon-seasonalmodelspecieshavebeenwelldescribed,insightsintothemolecularnetworkregula

8、tingseasonalreproductionareseverelylimited.PlateaupikaisasmallrodentspeciesnativetotheQinghai-Tibetanplateauanditssurroundingareas.April-Julyisthebreedingstageoftheadultplat