erk12信号传导通路介导的bfgf在人晶状体上皮细胞增殖分化中的作用和机制

《erk12信号传导通路介导的bfgf在人晶状体上皮细胞增殖分化中的作用和机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中图分类号：R89；R36；R39硕士学位论文ERK1/2信号传导通路介导的bFGF在人晶状体上皮细胞增殖分化中的作用和机制院（系）、所临床医学院研究生姓名杨楠学科、专业眼科学导师姓名康刚劲教授二Ο一三年四月目录1ERK1/2信号传导通路介导的bFGF在人晶状体上皮细胞增殖分化中的作用和机制………………………………………11.1中文摘要……………………………………………………11.2英文摘要……………………………………………………41.3前言…………………………………………………………71.4材料与方法………………………………

2、…………………121.5结果…………………………………………………………251.6讨论…………………………………………………………341.7结论…………………………………………………………441.8参考文献……………………………………………………451.9英汉缩略词对照表…………………………………………532致谢…………………………………………………………553硅油填充与并发性白内障（综述）………………………562ERK1/2信号传导通路介导的bFGF在人晶状体上皮细胞增殖分化中的作用和机制中文摘要目的：本实验将培养人晶状体上

3、皮细胞进行分组，设定在相同剂量的一定时间内用bFGF及ERK信号通路阻断剂PD98059刺激后，检测各组间的细胞数量、α-平滑肌肌动蛋白mRNA及磷酸化ERK的表达有无差异及各组之间的趋势，探讨PCO的形成是否在bFGF的介导下通过ERK途径参与及相关机制。方法：采用体外原代培养人晶状体上皮细胞进行复苏、传代及培养。待培养细胞传代3-5次，倒置相差显微镜观察细胞生长良好，覆盖培养瓶达70-80%，即达到实验要求。加入10ug/LbFGF及特异性阻断剂PD98059作用一定时间并根据作用时间进行分组。MTT法检测HLECs数量及

4、活性；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定HLECs中α-SMAmRNA的表达；免疫印迹实验(Westernblot)检测ERK蛋白磷酸化水平。所有实验数据均在SPSS19.0系统软件上进行统计。结果：1.HLECs的数量在仅加了bFGF组中均增多，细胞活性增强，二组间差异无统计学意义(P>0．05)，作用时间较长组，细胞数量多于作用短组，差异有统计学意义(P<0．05)；只加bFGF组细胞数量明显多于只加阻断剂组及空白对照组，差异有统计学意义(P<0．05)；只3加入PD98059组无论在细胞数量及细胞活性,均低于其他组,

5、差异有统计学意义(P<0．05)；在均加入bFGF及PD98059组中，可见阻断剂作用时间长组细胞数量及活性低于作用短的组别，差异有统计学意义(P<0．05)。2.bFGF作用剂量不变的情况下，随着作用时间的延长，可见α-SMAmRNA表达增加明显，二组间差别有统计学意义(P<0．05)；在bFGF作用时间6小时后，可见α-SMAmRNA值达最高，二组间差异有统计学意义(P<0．05)；加阻断剂PD98059作用后，α-SMAmRNA表达减少且随阻断剂作用时间的延长表达减少，二组间差异无统计学意义(P>0．05)。3．在bFG

6、F剂量相同的情况下,随着作用时间的延长，p-erk的表达量逐渐增多，证明了bFGF的分泌促进ERK信号通路的磷酸化。在空白对照组非磷酸化的表达多于磷酸化，作用0.5h以后，磷酸化表达开始多于非磷酸化，1小时左右磷酸化表达到达一个高峰，到6小时可见磷酸化与非磷酸化的表达相差不明显。结论：1.bFGF对HLECs具有促增殖作用，在低浓度剂量不变的前提下，呈现时间相关性。2.bFGF可促进HLECs分泌α-SMA，促进HLECs分化，并呈现时间及剂量相关性。3．bFGF可能通过促进磷酸化的表达激活ERK1/2信号通路，促进HLECs

7、的增殖和分化。4关键词：后发性白内障碱性成纤维细胞生长因子人晶状体上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白胞外调节激酶ERKERK信号通路阻断剂5TheeffectandmechanismofbFGFmediatedbyERK1/2signalingpathwayontheproliferationanddifferentiationofhumanlensepithelialcellsAbstract:Objective:Accordingtotheexperiment,culturedHLECsunderbFGFstimulationan

8、dblockingagentPD98059withERKsignalpathway,respectively,todetecttheexpressionofα-SMA(alphasmoothmuscleactin)mRNAandphosphorylation,whethert