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时间:2019-03-01
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1、《中国图书资料分类法》单位代码:10660分类号:R363学号:S110007贵阳医学院2014届硕士学位论文miRNA21在糖尿病大鼠肾组织中表达变化的研究研究生:石磊导师:郭兵教授年级:2011级专业:病理学与病理生理学2014年5月20日万方数据目录摘要………………………………………………………1前言………………………………………………………3材料与方法……………………………………………………5结果………………………………………………………13讨论………………………………………………………21结论………………………………………………………24参考文献……………………………………
2、…………………25英文摘要………………………………………………………28致谢………………………………………………………30略缩词表………………………………………………………31论文原创性声明………………………………………………32附:综述……………………………………………………33万方数据贵阳医学院2014届硕士研究生论文miRNA21在糖尿病大鼠肾组织中表达变化的研究专业:病理学与病理生理学研究生:石磊导师:郭兵教授【摘要】目的动态观察miRNA21在糖尿病大鼠肾组织及高糖环境下肾小管上皮细胞中的表达变化,探讨miRNA21在糖尿病肾病发病过程中的作用及其作用机制,为糖尿病肾病的防
3、治寻求新的靶点。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM),糖尿病胰岛素治疗组(INS)。采用链脲佐菌素(55mg/kg)尾静脉注射复制1型糖尿病大鼠模型,NC组和DM组成模后分别于8周(8w)、16周(16w)、24周(24w)处死;成模13周起,INS组大鼠采用胰岛素个体化治疗,以血糖控制在4-7mmol/L,尿糖阴性为准,于24周时处死大鼠。体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E),随机分为:正常糖对照组和高糖组。生化方法测血糖、24h尿蛋白;HE染色光镜下观察胰腺组织形态结构变化,HE、PAS、Masson染色光镜下观察肾组织形态结构变化;免疫组化观察大鼠
4、肾脏TGF-β1、FN、Col-1、Col-3、E-cadherin、α-SMA蛋白的表达情况;Westernblotting检测大鼠肾组织E-cadherin、α-SMA蛋白的表达变化;Realtime-PCR检测大鼠肾组织及高糖环境下肾小管上皮细胞miRNA21的表达情况。结果(1)与NC组大鼠相比,各组DM大鼠血糖和24h尿蛋白量均显著升高(P<0.05);与DM组比较,INS组上述指标则明显降低(P<0.05),且肾纤维化病变改善。(2)免疫组化结果显示,与NC组大鼠相比较,DM大鼠肾组织TGF-β1、FN、Col-1、Col-3和α-SMA表达明显增加(P<0.05),E-
5、cadherin表达减少(P<0.05);与DM组相比,INS组TGF-β1、FN、Col-1、Col-3和α-SMA的表达明显减少(P<0.05),E-cadherin的表达显著增多(P<0.05)。(3)Westernblotting结果显示,与NC组大鼠相比,DM大鼠肾组织E-cadherin的表达减少(P<0.05)、α-SMA表达增加(P<0.05);与DM组相比,INS组大鼠肾组织E-cadherin的表达增加(P<0.05)、α-SMA表达减少(P<0.05)。(4)Realtime-PCR结果显示DM大鼠肾组织miRNA21mRNA的表达较NC组大鼠增多(P<0.05
6、),而INS组miRNA21mRNA表达较DM组显著减少(P<0.05);经高糖处理后肾小管上皮细胞miRNA21mRNA较正常糖对照组表达增多(P<0.05)。结论(1)miRNA21mRNA在DM大鼠肾组织和高糖培养的肾小管上皮细胞的表达增多;(2)胰岛素控制血糖能下调1万方数据贵阳医学院2014届硕士研究生论文miRNA21mRNA在DM大鼠肾组织中的表达,同时能延缓和减少肾小管上皮细胞的EMT及肾间质ECM的沉积,改善肾纤维化病变。(3)miRNA21可能参与了DN的发生发展过程。【关键词】MiRNA21、E-cadherin、α-SMA、DN糖尿病肾病、DM大鼠2万方数据贵
7、阳医学院2014届硕士研究生论文前言糖尿病肾病(diabeticnephropathy,DN)是糖尿病(diabetesmellitus,DM)最常见而严重的并发症之一。近年来随着我国居民生活饮食习惯、结构的改变,DM的患病率呈直线上升趋势。随着DM发病率逐年增高,DN已成为导致慢性肾衰竭的主要病因之一,在欧美国家和我国经济发达地区,DN肾衰已成为新增透析和肾移植的首要原因。DN的主要病理特征包括肾小球硬化和肾小管间质纤[1]维化,尤其是肾小管间质纤维化在
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