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《靶向fak的sirna对喉癌细胞增殖及侵袭能力的抑制作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、靶向FAK的siRNA对喉癌细胞增殖及侵袭能力的抑制作用张潜英，叶琳，余晓燕，沈娜，邓碧，吴晓松，陈鸿雁（重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,重庆400016）摘要：目的运用RNA干扰(RNAinterference，RNAi)技术阻断喉癌Hep-2细胞株中FAK基因的表达，并研究FAK基因沉默后对Hep-2细胞株产生的影响。方法针对FAK基因，构建2条干扰重组质粒FAK-pGenesil-CH1和FAK-pGenesil-CH2，1条阴性对照重组质粒FAK-pGenesil-HK；在脂质体的介导下转染喉癌He
2、p-2细胞株，用RT-PCR和Westernblot分析FAKmRNA及蛋白的表达；MTT法、流式细胞技术及体外侵袭实验测定干扰重组质粒对Hep-2细胞株的增殖、侵袭能力的影响。结果重组干扰质粒能有效地阻断Hep-2细胞株中FAK基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P＜0.05)；重组质粒转染Hep-2细胞后，细胞增殖抑制率分别为58.34%、52.78%，与对照组比较差别有统计学意义（P＜0.05）；干扰组G0～G1期细胞增多，S期细胞数量明显减少（P＜0.05）；FAK-pGenesil-CH1、FAK-pG
3、enesil-CH2作用Hep-2细胞株48h后，Hep-2细胞穿过Matrigel膜的个数分别为（56.0±6.7）、（51.0±5.1），与阴性对照组及正常对照组[分别为（152.0±9.4）和（139.0±8.1）]比较有统计学差别（P＜0.05）。结论干扰重组质粒能有效地抑制转染Hep-2细胞株的FAKmRNA及蛋白的表达，并能抑制Hep-2细胞株的增殖及侵袭能力。关键词：FAK；siRNA；RNA干扰；Hep-2细胞株；增殖；侵袭中图法分类号：R739.65文献标识码：AEffectofFAKgene
4、silencingonproliferationandinvasioninofHep-2cellsZHANGQian-ying,YELin,YUXiao-yan,SHENNa,DENGBi,WUXiao-song,CHENHong-yan(DepartmentofOtolaryngology,theTheFirstAffilatedHospital，,ChongqingMedicalUniversity，,Chongqing400016，,China)Abstract:objectiveObjectiveToo
5、bservetheeffectsofRNAi-mediatedFAKgeneonsilencinginonlaryngealcarcinomaHep-2cells．.MethodsConstructrRecombinantplasmidsgeneratingshorthairpinRNAwereconstructed,includingtwointerferentialsequencesFAK-pGenesil-CH1、,FAK-pGenesil-CH2andonenegativecontrolsequence
6、FAK-pGenesil-HK.Hep-2cellsweretransfectedwithrecombinantplasmids．.FAKmRNAandFAKproteinwereanalyzedrespectivelybyRT-PCRandWesternblotting,respectively．.Cellproliferation、,cellcycleandinvasionofHep-2cellswereobservedbyMTTassay、,flowcytometry（FCM）andtranswellin
7、vasionassay,respectively.ResultsRecombinantplasmidsofFAK-pGenesil-CH1andFAK-pGenesil-CH2downregulatedtheexpressionsofFAKmRNAandprotein(P<0.05)；.TheproliferationinhibitionratioinHep-2cellsreachedto58.34%、and52.78%,%48hourshaftertransfectionofrecombinantplasmi
8、dsofFAKpGenesil-CH1、andFAK-pGenesil-CH2,whilethatthecontrolwas8.34%inthecontrol(P<0.05)（P<0.05）.;FCManalysisshowedthatmMorecellsstayarrestedatinG0-/G1phaseinthetransfectedgroupsthancontrols;.The
