电针百余、四神聪mcao模型大鼠nogo-a、camll表达及学习记忆能力的影响

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1、四刖医抖太堂亟±堂位论塞目录1电针百会、四神聪对MCAO模型大鼠Nogo.A、CaMKII表达及学习记忆能力的影响11.1中文摘要11.2英文摘要41.3前言“一..一一一一“······一91.4材料与方法111.5结果221.6讨论··················421.7结论······-·一·····················501.8参考文献511.9英汉缩略词对照表622致谓}······························633针灸治疗脑梗死后认知功能障碍的研究现状(综述)64万方数据电针百会、四神聪对MCAO模型大鼠海马区Nogo—A、CaMK

2、II表达及学习记忆能力的影响摘要目的:本实验通过制做大脑中动脉闭塞脑梗死(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)大鼠模型模拟脑卒中后认知功能障碍(poststrokecognitiveimpairment,PSCI),观察电针百会、四神聪穴对MCAO模型大鼠Morris水迷宫(Morriswatermaze,MWM)测试成绩及海马区Nogo.A、CaMKII蛋白表达的影响,从宏观行为到微观细胞和分子等多水平上探讨电针治疗PSCI学习记忆障碍可能的作用机制,并为针灸治疗PSCI提供理论和实践依据。方法:(1)对象筛选及分组:用MWM实验筛选出84只无学

3、习记忆障碍大鼠;随机分为正常组(n=12)、模型组(n=24)、假针刺组(n=24)、电针组(n=24),4组又随机分为1d、7d、14d和28d共4个时点进行观察的4个亚组;除正常组外的3组大鼠均采用照改进后的Longa方法制作左侧MCAO模型;评价后造模成功的大鼠纳入试验,不成功者剔除并补组。(2)干预措施:正常组及模型组常规喂养,不给予任何处理,但在其它组实验时同等条件抓取;电针组给予针刺并加电针;假针刺组针灸针固定于穴位外而不刺入;针刺选穴“百会”、“四神聪”。(3)观察指标:除MWM实验在造模后第7d、14d、28d进行外,余各项指标的观察均在第1d、7d、14d、28d

4、共4个时点进行。①大鼠行为学MWM实验,包括定位航行试验及空间探索试验;②水迷宫试验万方数据后取材进行HE染色观察大鼠海马脑组织病理学变化:③采用免疫组化检测脑梗侧海马区Nogo—A的表达;④采用免疫组化检测脑梗侧海马区CaMKII的表达。(4)统计学处理:所得计量数值采用均数4-标准差(X+S)表示;实验数据采用IBMSPSSStatistics19.0软件进行统计分析;以P<0.0为具有统计学意义,并且以P

5、性相关分析;将所有数据及分析结果采用GraphPadPrism5软件绘制成图。结果:①行为学MWM测试:模型组大鼠在定位航行试验和空间探索试验中均表现出明显的学习记忆障碍,电针组大鼠在两类行为学测试中成绩均明显优于模型组和假针刺组(尸<0.05),模型组与假针刺组MWM测试结果无统计学差异(尸>O.05);②Nogo.A表达免疫组织化学染色结果:通过免疫组化检测Nogo.A阳性产物平均光密度值,电针治疗7d、14d和28d后Nogo.A表达降低,和正常组、假针刺组相比,差异具有显著意义(P

6、免疫组织化学染色结果:模型组CaMKII阳性产物平均光密度值低于正常组(P/o.01),电针治疗7d、14d和28d后可增加CaMKII的表达,和正常组、假针刺组相比,差异具有显著意义(P0.05);④行为学MWM测试成绩与Nogo.A表达呈负相关,行为学MWM测试成绩与CaMKII表达呈正相关,Nogo.A表达与CaMKII表达呈负万方数据四刖医抖太堂硒±堂僮j金塞相关。结论:本研究通过制作PSCI模型,观察电针“百会、四神聪"干预对MCAO模型大鼠学习记忆能力及Nogo—A、CaMKII表达的关系,得出如下结论:

7、1.MCAO模型大鼠学习记忆力下降,MCAO模型能模拟PSCI大鼠的学习记忆功能障碍:2.电针“百会、四神聪"穴可降低海马内Nogo.A表达,增加海马内CaMKII的表达;3.电针改善PSCI大鼠学习记忆能力与Nogo.A表达呈负相关,与CaMKII的表达呈正相关;4.电针“百会、四神聪”穴能够改善PSCI大鼠的学习记忆能力;5.电针“百会、四神聪”穴改善PSCI大鼠的学习记忆能力与针刺的安慰效应无关;6.电针改善PSCI大鼠学习记忆能力的机理可能与电针下调神经再生抑

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