胃癌pten、vegf与微血管密度相关性及意义

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1、胃癌PTEN、VEGF与微血管密度相关性及意义作者：唐咏梅黄明哲胡茂通朱献斐费哲为张一楚PTEN基因(phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosometen,PTEN)，又名MMAC1/TEP1基因，为第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白的抑癌基因［1］。而血管内皮生长因子(Vascularendothelialgroicrovasculardensity，MVD），结合临床病理学特征，以明确PTEN、VEGF表达与MVD的关系及其临床意义。　　1材料和方法　　1.1一般资料　　收集本院2003年1月至2004年6月手术切除胃癌标本138例

2、。其中男91例，女47例，年龄30～82岁，73例年龄超过60岁。按UICC标准，TNM分期Ⅰ、Ⅱ期80例，Ⅲ、Ⅳ期58例；淋巴结转移数≥1个95例；伴有血管浸润49例；术前未接受放疗和化疗。　　1.2方法　　（1）取材制片:选取肿瘤细胞丰富，无坏死组织的石蜡标本，每一蜡块连续切取三张4μm厚切片。（2）染色步骤:采用SP超敏浓缩试剂盒，临用前稀释100倍；组织切片经二甲苯脱蜡、酒精水化,水浴中煮沸15min行抗原热修复；滴加适当稀释的第一抗体［PTEN(1:60)，VEGF(1:100)和CD34(1:60)均为福州迈新产品］,孵育60min；再滴加第二抗体,孵育15min，过氧化酶反应

3、5min，以上反应均置于37℃培养箱。DAB显色,苏木素复染,封片。　　1.3结果判断　　在临床病理资料的双盲条件下，分别由二位经验丰富的病理医师，在肿瘤实质区选取8个视野，记数肿瘤细胞总数及阳性染色肿瘤细胞所占比例，独立判定结果，最后核实确认。PTEN阳性表达为细胞浆染色；VEGF阳性表达为肿瘤细胞核染色成棕褐色；将阳性表达肿瘤细胞百分比≤10％记为-；11～25%记为＋；26～50%记为++；＞50%记为+++。阳性细胞数＞10％为结果阳性。　　1.4MVD测定　　采用CD34抗体标记血管内皮细胞，低倍镜下选取肿瘤浸润区域微血管数量最密集的视野，再在200倍视野范围计算3个视野的微血管

4、数目，取其平均值作为MVD［４］。肿瘤区域凡是染成棕色的单个内皮细胞或内皮细胞簇，均作为一个血管计数。　　1.5统计学处理　　利用SPSS12.0for.　　2.3胃癌PTEN、VEGF表达与MVD的关系　　PTEN表达与MVD之间具有非常显著性意义，PTEN表达阴性者MVD为48.52，显著高于PTEN表达阳性者的42.10，P<0.01；VEGF表达与MVD之间具有非常显著性，VEGF表达阳性者MVD为46.91，显著高于VEGF表达阴性者的39.10，P<0.01；见表2。表2胃癌中PTEN、VEGF表达与MVD的相关性（略）注：**P<0.01　　2.4胃癌PTE

5、N、VEGF表达的相关性　　VEGF表达阳性率在PTEN阴性组为94.9％（75/79），显著高于PTEN阳性组的72.9％（43/59），P<0.01；等级相关分析结果为rs=－0.548,P<0.01，表明PTEN和VEGF表达之间存在显著的负相关，见表3。表3胃癌中PTEN、VEGF表达的关系（略）注：**P<0.01　　3讨论PTEN是第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,与肿瘤浸润、转移及血管新生(angiogenesis)关系密切。PTEN在正常胃腺上皮表达阳性，胃癌肿瘤细胞其表达阳性率仅为42.7％，提示PTEN存在一定程度的失活现象。PTEN表达阳性率在

6、浸润深度超过肌层、淋巴结有转移、临床分期为Ⅲ、Ⅳ期者，与对照组比较，呈显著性的低表达（P<0.05或P<0.01）。随着肿瘤的演进，PTEN表达呈下降趋势，与ZhengHC等［５］的研究一致，PTEN表达与浸润深度、转移、生长类型、Lauren’s分型、组织学类型显著相关。进展期胃癌明显下调。本研究胃癌VEGF表达阳性率达85.5％，VEGF阳性表达与分化程度、淋巴结转移、血管浸润相关，与年龄、性别、浸润深度、临床分期等均无相关性。VEGF高表达在分化型多见，可能与腺管上皮的局部蛋白集聚有关。而与淋巴结转移、血管浸润的相关性，强烈提示与转移能力的关系。